SD大鼠骨髓间充质干细胞的分离及5-氮胞苷对其的诱导分化作用

发布时间：2017-09-15 01:19

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【摘要】：目的探讨SD大鼠骨髓间充质干细胞(SD-MSCs)体外分离的方法条件、生物学特性及5-氮胞苷对其的诱导分化作用。方法采用全骨髓贴壁法分离培养SD-MSCs,进行形态学观察.绘制生长曲线,流式细胞仪对其细胞周期进行分析,并通过成脂肪诱导鉴定,给予5-氮胞苷进行诱导分化。通过免疫组化和蛋白免疫印迹法,观察其对超极化激活环核苷酸门控的通道蛋白(HCN_2)表达情况。结果 SD-MSCs以长梭形和多角形为主,呈放射状集落生长.细胞生长曲线呈S形,增殖能力比较活跃。成脂肪诱导后,细胞胞质内有大量橙红色脂滴形成。不同浓度的5-氮胞苷对SD-MSCs进行诱导分化后,7.5、10、12.5μmol/L5-氮胞苷诱导的HCN_2表达阳性强度较高,其中10μmol/L的5-氮胞苷诱导24h的SD-MSCs HCN_2表达强度最高。结论全骨髓贴壁法能够有效分离纯化增殖SD-MSCs,5-氮胞苷能够诱导其分化为HCN_2表达阳性的细胞。
【作者单位】： 浙江中医药大学第二临床医学院;浙江绿城心血管病医院;浙江医院;
【关键词】： 骨髓间充质干细胞 全骨髓贴壁法 -氮胞苷
【基金】：浙江省高层次创新人才培养项目(02099)
【分类号】：R329
【正文快照】： 骨髓间充质干细胞(MSCs)是一类存在于骨髓中的干细胞,它不仅可以为造血干细胞(HSC)提供基质环境促进HSC增殖,而且也可以在体内外适当的刺激下诱导分化成不同类型的细胞叭5-氮胞苷可以降低细胞DNA的甲基化水平,进而与MSCs向心肌细胞分化的特异启动基因上的阻遏蛋白相结合|21,有

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