慢病毒介导骨形态发生蛋白2基因转染大鼠骨髓内皮祖细胞

发布时间：2017-09-18 23:24

  本文关键词：慢病毒介导骨形态发生蛋白2基因转染大鼠骨髓内皮祖细胞

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【摘要】：背景:基因治疗已成为疾病治疗的新趋势,为某些难治性疾病带来了曙光,合适的细胞、基因及载体的选择是治疗的关键。目的:探讨慢病毒介导骨形态发生蛋白2基因转染大鼠骨髓内皮祖细胞应用于基因治疗的有效性和可行性。方法:从SD大鼠骨髓分离、培养、鉴定内皮祖细胞,采用构建的慢病毒载体(LV)将空载体(LV-eGFP)或骨形态发生蛋白2基因(LV-eGFP-BMP2)转染至内皮祖细胞,通过eGFP荧光检测转染效率。ELISA法检测上清液中骨形态发生蛋白2蛋白的分泌,Western blot法检测细胞骨形态发生蛋白2蛋白的表达,比较转染后细胞的迁移、增殖和抗凋亡能力。结果与结论:慢病毒介导骨形态发生蛋白2载体的转染效率可达90%。与正常内皮祖细胞、转染空载体内皮祖细胞比较,转染骨形态发生蛋白2基因的内皮祖细胞分泌和表达骨形态发生蛋白2蛋白增加(P0.01),迁移和增殖能力无明显改变(P0.05),肿瘤坏死因子α损伤后的细胞凋亡率明显降低(P0.05)。结果表明慢病毒介导骨形态发生蛋白2载体可成功转染内皮祖细胞,转染后可增加内皮祖细胞分泌和表达骨形态发生蛋白2蛋白,增强对炎性损伤的抗凋亡能力,对迁移能力和增殖活性无明显影响。
【作者单位】： 中国医科大学附属第一医院;
【关键词】： 内皮细胞 骨形态发生蛋白质类 慢病毒属 转染 干细胞 培养 内皮祖细胞 骨形态发生蛋白 慢病毒载体 基因转染 国家自然科学基金
【基金】：国家自然科学基金资助(81071530)~~
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 文章亮点:1实验将修复内皮损伤的内皮祖细胞、调控干细胞功能的骨形态发生蛋白2基因和新兴的慢病毒载体三者相结合,完成了慢病毒介导的内皮祖细胞骨形态发生蛋白2基因转染,为相关疾病的基因治疗提供了新的工具。2实验结果证实骨形态发生蛋白2基因转染可增强内皮祖细胞对炎性损

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