A、C、Y、W135群脑膜炎奈瑟菌血清抗体特异性体外杀菌试验方法的建立及其验证

发布时间：2017-09-23 15:09

  本文关键词：A、C、Y、W135群脑膜炎奈瑟菌血清抗体特异性体外杀菌试验方法的建立及其验证

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【摘要】：目的建立A、C、W135和Y群脑膜炎奈瑟菌血清抗体特异性体外杀菌试验方法 (serum bactericidal assay,SBA),并进行验证。方法对SBA中活菌收获时间、靶菌的制备、反应时间及补体进行优化,并确定质控血清Men10的质控范围。对优化后的方法进行特异性、线性、精密度验证。结果确定A600值为0.5~0.8时为收获细菌最佳收获时间;冻存菌种可替代新鲜制备菌种作为靶菌;最佳杀菌反应时间为60 min;17830和84321N批补体均可用于试验。质控血清Men10的质控范围A群为521~4 689,C群为1 047~9 423,W135群为1 779~16 008,Y群为1 416~12 741。A、C、W135和Y同群多糖吸收血清样品后能够抑制≥80%的同群SBA滴度,而异群多糖则20%;血清样品稀释倍数与对应的SBA滴度呈显著负相关,斜率在-0.90~-1.10之间,Pearson相关系数在0.90~1.0之间,P均0.001;同一实验内相同样品检测结果 CV≤25%,实验间相同样品的95%的检测结果落在检测值中位数3倍(一个稀释度)的范围内,CV≤40%,不同实验室间相同样品的检测结果至少有70%落在美国CDC公布结果的3倍(一个稀释度)范围内。结论建立了标准化的具国际间可比性的A、C、W135和Y群脑膜炎奈瑟菌SBA,该方法特异性、线性和精密度良好。
【作者单位】： 兰州生物制品研究所有限责任公司甘肃省疫苗工程技术研究中心;美国阿拉巴马大学伯明翰分校病理系NIH细菌性呼吸道病原参考实验室;中国食品药品检定研究院;中国生物技术集团公司;
【关键词】： 血清抗体杀菌试验 脑膜炎奈瑟菌
【基金】：国家科技支撑计划(2008BAI66B01)资助
【分类号】：R378.15;R392-33
【正文快照】： 脑膜炎奈瑟菌(Neisseria meningitidis)是世界范围内引起儿童脑脊髓膜炎和败血症等严重疾病的主要病原菌[1]。患者不仅病死率高,且后遗症严重[2]。依据荚膜多糖的组成成分和抗原性差异,将奈瑟脑膜炎链球菌分为13个血清群,A、B、C、W135、X和Y6个血清群是主要的致病群。预防脑

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