大鼠海马组织RNA、DNA和蛋白质共提取方法的研究

发布时间：2017-10-01 02:23

  本文关键词：大鼠海马组织RNA、DNA和蛋白质共提取方法的研究

  更多相关文章： Trizol 海马 RNA DNA 蛋白质

【摘要】：目的探讨Trizol法同时提取大鼠单侧海马组织RNA、基因组DNA和蛋白质的可行性及优势。方法 Trizol法提取成年雄性Sprague-Dawley大鼠单侧海马组织RNA、基因组DNA以及蛋白质;商业化试剂盒提取另一侧海马组织基因组DNA,RIPA裂解液提取蛋白质。用超微量分光光度计和SYBR实时定量RT-PCR法检测Trizol法提取的RNA的质量,利用超微量分光光度计和聚合酶链式反应(PCR)法比较两种方法提取DNA的效果及质量,采用Western blot法比较两种方法提取蛋白质的效果。结果 Trizol法提取单侧海马RNA的质量浓度介于1 178.3~2 225.8ng/μL之间,A260/280介于2.01~2.03,A260/230介于1.88~2.22,并获得了稳定的β-actin和GR循环域值。Trizol法和试剂盒提取单侧海马DNA的质量浓度分别介于215.7~271.8ng/μL和268.6~872.5ng/μL之间,均适于充当PCR反应模板。Trizol法和RIPA裂解液提取的蛋白质在Western blot法检测目的蛋白含量的过程中均呈现清晰的条带。结论 Trizol法提取大鼠单侧海马组织RNA的同时提取的DNA和蛋白质,与商业化试剂盒和RIPA裂解液从不同海马组织中分别提取基因组DNA和蛋白质的效果相当。采用Trizol法同时提取海马组织的RNA、DNA和蛋白质,不仅提高了实验效率、节约了实验成本,而且有效避免了因反复实验操作带来的人为干扰及误差。
【作者单位】： 西安交通大学医学院遗传学与分子生物学系;西安交通大学医学院环境与疾病相关基因教育部重点实验室、生物医学基础研究中心;
【关键词】： Trizol 海马 RNA DNA 蛋白质
【基金】：国家自然科学基金资助项目(No.81200845)~~
【分类号】：R346
【正文快照】： 各种动物模型建立后,研究人员通常期望能够从DNA、RNA以及蛋白质水平对某一特定的组织或部位进行深入的研究。但是,所研究的动物具有个体差异性,采用不同的动物分别进行DNA、RNA以及蛋白质3个水平的研究极有可能出现实验结果的不一致性;其次,所研究的特定部位通常具有不可分割

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 汪军;金凯舟;王娟;陈正军;胡志前;;一种高效同时提取微量组织中总RNA、DNA和蛋白的技术方法的改进[J];肝胆胰外科杂志;2012年04期

2 董华;王军军;应天翼;李霆;王恒j;许彩民;;一种同时提取细胞总RNA和总蛋白的方法[J];生物技术通讯;2005年06期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 包伍叶;李卫东;卢峻;宋映周;图娅;;电针对慢性应激抑郁大鼠脑内ERK信号转导通路的影响[J];中华中医药杂志;2014年06期

2 李生强;李亚婵;梁文娜;陈妍;李灿东;;柴胡疏肝散对围绝经期综合征肝郁证大鼠模型海马ERK1/2的影响[J];中华中医药杂志;2014年10期

3 陈晓娟;闫少春;邵国;;人DNA甲基化转移酶的分类及其功能[J];包头医学院学报;2014年04期

4 孙明英;闫少春;邵国;;颤蛋白在学习记忆中的作用[J];包头医学院学报;2014年06期

5 居玲莎;李仁奇;杨建军;徐建国;;DNA甲基化修饰在学习记忆中的作用[J];临床麻醉学杂志;2015年08期

6 庆格乐图;杨薇薇;晏鹏飞;苏幼红;李江伟;;人乳头瘤病毒L1基因与丹毒丝菌SpaA-N优势抗原表位序列的嵌合重组质粒构建及活性鉴定[J];生物技术通报;2011年10期

7 杨美;郭晓东;周艳贤;李瑞生;熊璐;张红萍;;miRNA-492在肝癌中表达变化的研究[J];现代生物医学进展;2013年10期

8 张杰;武晶晶;赵飞飞;闫宇翔;赵志强;;不同温度和不同放置时间对总RNA提取浓度和纯度的影响[J];实验技术与管理;2013年11期

9 张虹亮;计红;耿仁德;薛琳琳;杨焕民;王建发;司鸿飞;王慧;甘艺;;籽鹅卵泡颗粒细胞α-烯醇化酶基因RNA干扰表达质粒的构建及鉴定[J];中国生物制品学杂志;2014年04期

10 徐说;林文娟;;抗炎性细胞因子与抑郁症[J];生物化学与生物物理进展;2014年11期

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 王春强;神经营养素-4及其受体在牛成熟精子和支持细胞中的表达与功能研究[D];吉林大学;2013年

2 柴高尚;下调pp32恢复p300/CBP组蛋白乙酰化转移酶活性改善学习记忆障碍[D];华中科技大学;2013年

3 范安然;Tetl基因在猪诱导多潜能干细胞特性维持中的作用研究[D];吉林大学;2013年

4 吴尤佳;EphA5在先天性甲状腺功能减低大鼠脑中的表达及DNA甲基化调控[D];苏州大学;2014年

5 查盈盈;富勒醇对大鼠的海马神经元活性以及学习记忆的影响[D];中国科学技术大学;2014年

6 高峰;伽玛辐射对大脑学习和记忆的影响及其机理研究[D];南华大学;2012年

7 陈琳;基于CREB信号转导通路研究人参总皂苷抗抑郁模型小鼠海马结构可塑性损伤的机理[D];南京中医药大学;2014年

8 杨柳;电针的抗抑郁作用及其促海马神经干细胞增殖的相关机制[D];复旦大学;2012年

9 杨勇;亲代大鼠神经病理性疼痛对子代情绪行为学的影响及与杏仁核DNA甲基化的关系[D];中南大学;2013年

10 王春蕾;拟南芥中MBD7参与调控ROS1介导的DNA去甲基化机制的研究[D];中国农业大学;2015年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 罗丹丹;鸭瘟病毒UL47基因转录时相分析及主要抗原域的原核表达和抗体制备[D];四川农业大学;2010年

2 许峰;羊肌细胞生成素（MyoG）基因的克隆、表达及成肌活性研究[D];扬州大学;2011年

3 张冠雄;急慢性应激对小鼠空间学习记忆的影响及脑内bFGF的作用[D];曲阜师范大学;2013年

4 黄婉立;三例精神分裂症病例报告[D];浙江大学;2013年

5 吕清;5-羟甲基胞嘧啶在大鼠脑组织中分布及发育作用的研究[D];浙江大学;2013年

6 王永辰;番木瓜花叶病毒海南分离物cDNA克隆及其因诱导基沉默载体的构建与分析[D];海南大学;2013年

7 王娟;肝细胞核因子4α在结直肠癌中表达及其临床意义[D];第二军医大学;2013年

8 余冰颖;开心散治疗CMS抑郁模型大鼠的作用机制及活性成分TenuifolisideA基于ERK和PI3K通路介导的神经保护机制研究[D];河北北方学院;2013年

9 柴荣;依赖DNA序列的核小体定位的实验研究[D];内蒙古科技大学;2013年

10 张姝;低氧预适应小鼠海马中DNA甲基化转移酶、Reelin和蛋白磷酸酶-1的表达[D];内蒙古科技大学包头医学院;2013年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 李琴;;2种提取大鼠肝RNA方法的比较[J];新乡医学院学报;2008年01期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 刘宁;;“RNA干扰”的功能调控机制[J];国外医学情报;2004年02期

2 袁成福;;RNA干扰及其实验方法[J];湖北民族学院学报(医学版);2005年04期

3 ;第四届全国RNA学术研讨会讯息[J];国际医药卫生导报;2005年02期

4 纪虹;孙开来;;小RNA的研究现状[J];国际遗传学杂志;2006年01期

5 陈柳青;曾学思;孙建方;;石蜡包埋皮肤组织标本中提取RNA进行逆转录PCR的研究[J];中国麻风皮肤病杂志;2006年01期

6 ;重组RNA的表达——tRNA支架的巧妙运用[J];生物医学工程研究;2007年03期

7 张义玲;魏旭斌;蔡荣;钱程;;抑制RNA沉默现象的机理及其在生物医学领域内的应用[J];生物化学与生物物理进展;2007年12期

8 赵轶卓;孙妙囡;孙德军;;牛胰脏RNA Ⅱ的制备[J];吉林大学学报(医学版);2007年06期

9 万春鹏;周寿然;左爱仁;;RNA干扰机制及其应用研究进展[J];现代生物医学进展;2008年02期

10 刘新玉;;氟喹诺酮类抗生素可增强RNA干扰的效果[J];中国医药生物技术;2008年04期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 王蕾;王秦虎;单卫星;;大豆疫霉菌小RNA通路核心组件的识别分析及突变体筛选[A];2010年中国菌物学会学术年会论文摘要集[C];2010年

2 蒋锋;王传跃;陈晓岗;;RNA干扰技术及其应用[A];中国神经科学学会精神神经专业委员会成立大会暨第一届学术会议论文集[C];2004年

3 李艳;严明;;RNA干扰[A];第一届全国化学工程与生物化工年会论文摘要集(下)[C];2004年

4 宋尔卫;;RNA干扰疗法的开发应用:靶点选择和靶向导入[A];第四届全国RNA进展研讨会论文集[C];2005年

5 ;RNA-interference-based functional research on rat epididymis-specific gene 16 and human paternally expressed gene PEG10 and the therapeutic applications of RNA interference in HBV,SARS,liver cancer,liver fibrosis and keloid fibroblast[A];第四届全国RNA进展研讨会论文集[C];2005年

6 郭晓红;周忠孝;吴明煜;;RNA干涉的分子机制及技术研究进展[A];中国生理学会论文汇编2005年第一期[C];2005年

7 李涛;李前忠;;Prediction of RNA binding sites in proteins from sequence[A];第四届全国生物信息学与系统生物学学术大会论文集[C];2010年

8 Jian-Hua Yang;Liang-Hu Qu;;ChIPBase:decoding transcriptional regulation of long non-coding RNA and microRNA genes from ChIP-Seq data[A];生命的分子机器及其调控网络——2012年全国生物化学与分子生物学学术大会摘要集[C];2012年

9 戚益军;;植物小RNA和长非编码RNA[A];生命的分子机器及其调控网络——2012年全国生物化学与分子生物学学术大会摘要集[C];2012年

10 陈润生;;非编码RNA和RNA组学[A];第11届全国脂质与脂蛋白学术会议论文汇编[C];2012年

中国重要报纸全文数据库 前10条

1 记者 冯卫东;研究人员发现可破坏肿瘤抑制基因的小RNA[N];科技日报;2009年

2 记者 储笑抒 通讯员 盛伟;人体微小RNA有望提前发出癌症预警[N];南京日报;2011年

3 泸州医学院副教授、科普作家 周志远;“大头儿子”与环状RNA[N];第一财经日报;2014年

4 麦迪信;小分子RNA可能有大作用[N];医药经济报;2003年

5 董映璧;美发现基因调控可回应“RNA世界”[N];科技日报;2006年

6 张忠霞;特制RNA轻推一下,就能“唤醒”基因[N];新华每日电讯;2007年

7 聂翠蓉;RNA：纵是配角也精彩[N];科技日报;2009年

8 冯卫东;RNA干扰机制首次在人体中获得证实[N];科技日报;2010年

9 冯卫东　王小龙;英在地球早期环境模拟条件下合成类RNA[N];科技日报;2009年

10 记者 常丽君;新技术让研究进入单细胞内RNA的世界[N];科技日报;2011年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 邬开朗;RNA干扰在抑制病毒基因表达与复制中的作用研究[D];武汉大学;2005年

2 王立坤;RNA-seq数据的处理与应用[D];吉林大学;2012年

3 高爱保;重金属诱导长江华溪蟹RNA差异显示及定量分析[D];山西大学;2011年

4 沈梅;RNA沉默抑制子的生化和结构研究[D];北京协和医学院;2009年

5 陈祖玉;水稻内源非编码小RNA的多样性[D];武汉大学;2005年

6 刘振栋;包含假结的RNA结构预测算法研究[D];山东大学;2014年

7 李振亚;人肝脏特异性表达的小RNA-miR-122表达调控机制与功能的研究[D];中国协和医科大学;2010年

8 吕欣;嵌合型重组HCV cDNA的构建及体外转录RNA的感染特性研究[D];第四军医大学;2005年

9 赵阳洋;对具有复杂结构的伪扭结RNA的组合分析[D];南开大学;2012年

10 林美娟;茶尺蠖小RNA病毒RNA依赖的RNA聚合酶功能研究及全长cDNA克隆构建[D];武汉大学;2009年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 孙晓娜;针对HIV-1 vpr基因的RNA干扰作用研究[D];北京工业大学;2010年

2 樊梅娜;几种RNA沉默抑制蛋白的表达纯化及沉默抑制特性分析[D];山东农业大学;2012年

3 侯继业;RNA干扰技术用于流感病毒防治的探索研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2010年

4 林园园;乙型肝炎病毒RNA上La protein结合位点的缺失对其自身稳定性影响的实验研究[D];华中科技大学;2006年

5 周芳;家蚕细胞中RISC复合物结合小RNA的分离、鉴定与分析[D];浙江理工大学;2013年

6 黄守均;鸡的小RNA文库构建和非编码RNA的规模筛选[D];中国协和医科大学;2008年

7 陈志强;二甲亚砜通过作用于靶标RNA聚合酶提高转录活性[D];武汉大学;2005年

8 苏杨;LMW RNA分离方法改进及与人类胚胎发育相关miRNA的克隆表达[D];暨南大学;2007年

9 丁月芹;五种鼠基因组中4.5S RNA基因拷贝数的鉴定与分析[D];曲阜师范大学;2011年

10 刘中成;枣总RNA提取及mRNA差异显示技术体系的建立[D];河北农业大学;2005年

，

本文编号：951801