pcDNA3-HBsAg-p30-ROP2真核表达载体的构建与鉴定

发布时间：2017-10-01 15:26

  本文关键词：pcDNA3-HBsAg-p30-ROP2真核表达载体的构建与鉴定

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【摘要】：目的构建pcDNA3-HBsAg-p30-ROP2多基因重组表达载体,并对其进行初步鉴定。方法根据重组体pcDNA3-p30-ROP2酶切位点和乙型肝炎表面抗原(HBsAg)基因序列等因素设计合成引物,扩增HBsAg目的基因片段,再应用酶切、连接等分子生物学技术将HBsAg目的基因克隆至pcDNA3-p30-ROP2表达载体中。应用聚合酶链反应(PCR)初筛,再采用酶切、测序等技术对构建的重组表达载体pcDNA3-HBsAg-p30-ROP2进行鉴定。结果 PCR扩增出HBsAg基因片段,构建了pcDNA3-HBsAg-p30-ROP2多基因真核表达载体。PCR与酶切结果显示,该基因片段大小均与理论值相符;测序结果显示该重组表达载体包含了p30-ROP2和HBsAg目的基因的完整序列。结论成功构建了多基因重组表达载体pcDNA3-HBsAg-p30-ROP2,为进一步研究多基因核酸疫苗奠定了基础。
【作者单位】： 山东省医学科学院 山东省寄生虫病防治研究所 山东省医学科学院寄生虫病分子免疫学重点实验室;济南大学-山东省医学科学院医学与生命科学学院;山东省济宁市第一人民医院;山东省戴庄医院;
【关键词】： 弓形虫 表面抗原(p) 棒状体分泌抗原(ROP) 乙肝表面抗原 基因重组
【基金】：山东省自然科学基金(2009ZRC03083、2009ZRC03050) 山东省医药卫生科技发展计划项目(2011HW049) 山东省济宁市科技计划项目(2013jnwk51) 山东省医学科学院科技计划(2013-01)
【分类号】：R346
【正文快照】： 乙型肝炎病毒(HBV)是不完全环状双链DNA病毒,也是至今已知对人类致病的最小双链DNA病毒[1]。乙肝表面抗原(HBsAg)是HBV包膜蛋白的组分,具有良好的免疫原性,常作为乙肝疫苗的理想候选分子。目前广泛使用的乙肝基因工程疫苗即为加工处理的HBsAg基因真核表达产物[2]。近年来研究

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8 唐昊U

本文编号：954235