泰山磐石散干预流产大鼠模型的相关免疫机制研究
本文关键词:泰山磐石散干预流产大鼠模型的相关免疫机制研究
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【摘要】:目的:用具有益气健脾、养血安胎功效的泰山磐石散干预流产模型的SD大鼠,观察孕鼠外周血中细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-10的变化,以及母胎界面蜕膜组织中TNF-α的表达分布情况,为阐述泰山磐石散治疗流产的机制提供实验依据,为保胎中药的开发奠定理论基础。方法:选取正常的15只SPF级的SD雄鼠和30只SPF级的SD雌鼠,然后将雄鼠和雌鼠按照雄:雌为1:2分配,合为一笼。将孕鼠随机分为3组,即正常组、模型组、干预组,每组10只孕鼠。正常组的孕鼠从妊娠的第1~11天给予蒸馏水灌胃10ml/kg/d,妊娠的第6~8天皮下注射75%的乙醇溶液lml/kg/d;模型组的孕鼠从妊娠的第1~11天给予蒸馏水灌胃10ml/kg/d,妊娠的第6~8天皮下注射溴隐亭(溶于75%的乙醇溶液)0.4mg/kg/d;干预组的孕鼠从妊娠的第1~11天给予泰山磐石散灌胃1()ml/kg/d,妊娠的第6~8天皮下注射溴隐亭0.4mg/kg/d;妊娠的第12天用20%的乌拉坦溶液腹腔注射麻醉孕鼠,剖开腹腔后腹主动脉采血,离心得血清,酶联免疫吸附实验检测血清中IFN-γ、IL-2、IL-10的水平;取出胎盘蜕膜组织,用4%的多聚甲醛固定后,免疫组织化学技术与图像定量分析TNF-α在母胎界面的表达情况。结果:1.正常组、模型组、干预组的流产率依次为0%、80%、20%,模型组的流产率明显高于正常组和干预组,差异具有统计学意义(P0.01和P0.05);正常组和干预组比较,无显著性差异(P0.05)。2.正常组、模型组、干预组血清中IFN-γ的含量依次为9.15±3.01pg/ml、13.78±2.79 pg/ml、 10.57±2.24pg/ml,模型组明显高于正常组和干预组,差异具有统计学意义(P0.01和P0.05),正常组和干预组比较,无显著性差异(P0.05)。3.正常组、模型组、干预组血清中IL-2的含量依次为3.40±0.63 pg/ml、3.86±1.49 pg/ml、2.11±0.51 pg/ml,正常组和模型组的含量明显高于干预组,差异具有统计学意义(P0.05和P0.01),正常组和模型组比较,无显著性差异(P0.05)。4.正常组、模型组、干预组血清中IL-10的含量依次为17.10±8.68 pg/ml、8.54±5.01 pg/ml、9.07±4.57 pg/ml,正常组的含量明显高于模型组,差异具有统计学意义(P0.05),模型组和干预组比较,无显著性差异(P0.05)。5.正常组、干预组的TNF-a在母胎界面两侧的表达分布子宫侧明显比胎盘侧表达量少,差异具有统计学意义(P0.05)。模型组的TNF-α在母胎界面两侧的表达分布子宫侧和胎盘侧相比,无显著性差异(P0.05)。结论:1.溴隐亭致流产模型孕鼠的血清中IFN-Υ高表达和IL-10低表达,TNF-α在母胎界面的异常表达分布,提示了IFN-γ、IL-10、TNF-α可能与流产的发生具有相关性。2.泰山磐石散干预溴隐亭致流产具有显著的疗效,它能够调低流产孕鼠血清中IFN-γ和IL-2的含量,且能将IFN-Υ调低至正常组水平,还能改善流产孕鼠母胎界面TNF-α的表达,使其分布趋于正常组水平。表明泰山磐石散可能通过调控IFN-γ和TNF-α的表达与分布,改变体内免疫环境,进而达到保胎作用。
【关键词】:流产大鼠 泰山磐石散 TNF-α IFN-γ
【学位授予单位】:福建中医药大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R285.5;R-332
【目录】:
- 缩略词表6-7
- 中文摘要7-9
- Abstract9-12
- 前言12-14
- 材料与方法14-19
- 1. 材料14-15
- 1.1 实验动物14
- 1.2 实验药品及仪器设备14-15
- 2. 方法15-18
- 2.1 药物的制备15
- 2.2 大鼠造模的分组及处理15
- 2.3 大鼠的取材15-16
- 2.4 酶联免疫吸附试验法测血清IFN-γ、IL-2、IL-10的表达16-17
- 2.5 免疫组织化学法分析孕鼠母胎界面TNF-α的表达17-18
- 3. 统计分析18-19
- 结果19-24
- 1. 三组孕鼠妊娠结果19
- 2. 三组孕鼠血清IFN-γ、IL-2、IL-10的表达情况19-22
- 3. 三组孕鼠母胎界面TNF-α免疫组化结果22-24
- 讨论24-30
- 1. 现代医学对自然流产的研究24-25
- 1.1 反复自然流产的定义、概念24
- 1.2 反复自然流产的发病原因24-25
- 2. 中医学对自然流产的研究25-28
- 2.1 “滑胎”病名及历史沿革25-26
- 2.2 传统中医在病因病机、治法方药上的认识26
- 2.3 现代中医对滑胎的认识及治疗26-27
- 2.4 泰山磐石散治疗滑胎的理论基础及现代药理研究27-28
- 3. 对泰山磐石散作用机制的探讨28-30
- 结论30-31
- 参考文献31-34
- 致谢34-35
- 文献综述35-41
- 参考文献39-41
- 作者简历41
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,本文编号:997077
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