13种实验动物对氧磷酶1酶活力的测定及脂多糖诱导败血症氧化应激动物模型酶活力变化研究

发布时间：2017-03-19 23:01

  本文关键词：13种实验动物对氧磷酶1酶活力的测定及脂多糖诱导败血症氧化应激动物模型酶活力变化研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：败血症是由细菌病原体或条件致病菌侵入血液循环并在血中生长和繁殖从而产生的急性全身性感染。可引起败血症的细菌主要有金黄色葡萄球菌、肠球菌,革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌、厌氧菌和真菌。目前,尽管医疗手段不断进步,治疗败血症仍是一个世界级难题。对氧磷酶1(Paraoxonase1,PON1)最初被发现,是由于其可以高效水解对氧磷而保护机体。PON1主要在机体肝脏中表达并分泌到各个与解毒相关的器官中,而其中又以肝脏和血液中的PON1表达量最高。PON1的活性水平与氧化应激和炎症反应密切相关,而败血症患者体内必然伴随着炎症反应与氧化应激的出现。根据文献报道,败血症患者体内的PON1活力低于正常人体内的PON1活力。因此,研究血清中的PON1活性与败血症的相关关系,并在其基础上建立败血症氧化应激动物模型,对于治疗败血症新药的研发具有十分重要的意义。本文通过先对13种在药物开发以及毒理研究中常用的实验动物,即Wistar大鼠、SD小鼠、沙鼠、豚鼠、C57BL/6小鼠、ICR小鼠、BALB/C小鼠、DBA/2小鼠、CBA/N小鼠、C3H/HeJ小鼠、F344大鼠、仓鼠、兔和正常人血清中的PON1的三种酶活性,即有机磷酸酯酶活性、芳香酯酶和内酯酶活性进行测定,发现C57BL/6小鼠和SD大鼠血清中的有机磷酸酯酶与人血清中有机磷酸酯酶总活力相当;C57BL/6小鼠和DBA/2小鼠血清中芳香酯酶与人血清中芳香酯酶总活力相当;ICR小鼠、BALB/C小鼠、DBA/2小鼠、CBA/N小鼠、C3H/HeJ小鼠和C57BL/6小鼠血清中内酯酶与人血清中内酯酶总活力相当。之后,选取其中三种实验动物,即沙鼠、C57BL/6小鼠和豚鼠进行脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导实验,试图发现一种相对具有代表性的实验动物。LPS诱导动物模型实验结果显示,豚鼠经过LPS诱导后三种酶活性都升高,与预期结果相反;而C57BL/6小鼠和沙鼠经过LPS诱导后三种酶活性都发生了不同程度的下降,与预期结果相同。因此在通过LPS诱导动物模型时应充分考虑不同动物之间诱导后酶活性的差异。如果在进行药物开发或者毒理研究时选用几种动物模型,应先考虑建立动物模型间数据转换的可能性,以及数据之间的相关性。相比较而言,通过LPS对来源更容易获得以及更具应用普遍性的C57BL/6小鼠进行诱导,建立败血症氧化应激动物模型,将更适用于败血症治疗药物的药效学研究。
【关键词】：对氧磷酶1 败血症 脂多糖诱导 有机磷酸酯酶 芳香酯酶 内酯酶
【学位授予单位】：东北师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R515.3;R-332
【目录】：

• 摘要4-5
• ABSTRACT5-8
• 第一章 前言8-18
• 1.1 败血症概述8-10
• 1.1.1 败血症及临床诊断8
• 1.1.2 败血症的病理过程及病原学变迁8-9
• 1.1.3 败血症的治疗9-10
• 1.2 对氧磷酶1的研究进展10-17
• 1.2.1 对氧磷酶家族10-11
• 1.2.2 对氧磷酶1的基本特点11-13
• 1.2.3 对氧磷酶1水解有机磷酸酯类化合物的催化机制13-14
• 1.2.4 对氧磷酶1与疾病的关系14-17
• 1.3 本课题研究的意义17-18
• 第二章 材料与方法18-22
• 2.1 实验材料、试剂和仪器18-20
• 2.1.1 主要实验材料18
• 2.1.2 主要实验试剂18-19
• 2.1.3 主要实验仪器19
• 2.1.4 主要溶液配制19-20
• 2.2 实验方法20-22
• 2.2.1 实验动物准备20
• 2.2.2 血清样本制备20-21
• 2.2.3 对氧磷酶1有机磷酸酯酶活性测定21
• 2.2.4 对氧磷酶1芳酯酶活性测定21
• 2.2.5 对氧磷酶1内酯酶活性测定21
• 2.2.6 脂多糖诱导实验21-22
• 第三章 结果与讨论22-35
• 3.1 不同动物间对氧磷酶1的三种酶活性的差异22-30
• 3.1.1 不同动物间对氧磷酶1的有机磷酸酯酶活性的测定以及与人血清中对氧磷酶1的有机磷酸酯酶活性的对比22-24
• 3.1.2 不同动物间对氧磷酶1的芳香酯酶活性的测定及与人血清中对氧磷酶1的芳香酯酶活性的对比24-27
• 3.1.3 不同动物间对氧磷酶1的内酯酶活性的测定以及与人血清中对氧磷酶1的内酯酶活性的对比27-29
• 3.1.4 小结29-30
• 3.2 脂多糖诱导后沙鼠、C57BL/6 小鼠和豚鼠血清中对氧磷酶1三种酶活性水平的变化30-35
• 3.2.1 LPS诱导沙鼠、C57BL/6 小鼠和豚鼠败血症氧化应激模型30
• 3.2.2 LPS诱导后沙鼠、C57BL/6 小鼠和豚鼠血清中对氧磷酶1有机磷酸酯酶总活力的变化30-31
• 3.2.3 LPS诱导后沙鼠、C57BL/6 小鼠和豚鼠血清中对氧磷酶1芳香酯酶总活力的变化31-32
• 3.2.4 LPS诱导后沙鼠、C57BL/6 小鼠和豚鼠血清中对氧磷酶1内酯酶总活力的变化32-34
• 3.2.5 小结34-35
• 第四章 结论35-36
• 参考文献36-39
• 英文缩略词39-40
• 致谢40

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