HIV-1疫苗免疫策略研究及HIV-1疫苗—抗逆转录病毒药物联合使用在SHIV/中国恒河猴模型中保护效果评价的研究

发布时间：2020-12-10 12:38

　　艾滋病是威胁人类的健康的最重要的传染病之一,其在全球的流行形势十分严峻,疫苗是预防控制传染病的最有效最经济的手段,因此研制出安全有效的艾滋病疫苗迫在眉睫。DNA疫苗作为最具发展潜力的新型疫苗策略,可以有效的诱导细胞免疫反应及体液免疫反应,同时可以诱导长期免疫记忆。然而,较弱的免疫原性一直是制约DNA疫苗产业化的瓶颈。本研究优化了HIV-1双表达盒DNA疫苗pENVPOL及pGAGTNR的免疫策略,并联合重组复制型痘苗病毒疫苗VTKgpe及蛋白疫苗gp140,采用初免-加强策略,大幅度提高了HIV-1疫苗的免疫原性。本研究首先探索了体内电穿孔技术对DNA疫苗质粒pENVPOL及pGAGTNR免疫原性的影响。实验结果表明,内电穿孔技术可以显著提升pENVPOL和pGAGTNR质粒在小鼠体内的表达水平。50μg DNA质粒使用体内电穿孔介导后,诱导的HIV-1 Env特异性抗体反应滴度提高了10倍,HIV-1抗原特异性细胞免疫反应强度提高了1倍；5μg DNA在使用体内电穿孔介导后,诱导的Env特异性抗体反应滴度仍为50μg单独肌肉注射组的5倍,总体HIV-1抗原特异性细胞免疫反应与50μg... 

【文章来源】：中国疾病预防控制中心北京市

【文章页数】：105 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１．３ＥＬＩＳｐｏｔ检测Ｔ细胞免疫反应结果??Ｆｉｇ?１．３?Ｔ?ｃｅｌｌ?ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ?ｄｅｔｅｃｔｅｄ?ｂｙ?ＥＬＩＳｐｏｔ

Ｅｎｖ抗原特异的体液免疫反应ＥＬＩＳＡ测定结果显示，ＤＮＡ肌肉注射后电（ＤＮＡ?ＩＭＥ巧组诱导的Ｅｎｖ特异性体液免疫反应强度显著高于单独肌肉注＋ＩＬ１５?佐剂（ＤＮＡ＆Ｌ－１５?ＩＭ）及?ＤＮＡ＋ＢＣＧ?佐剂组（ＤＮＡ＆ＢＣＧＩＭ），＋ＰＡ－ＭＳＨＡ佐剂组（ＤＮＡ＆ＰＡ?ＩＭ）免疫反应强度基本相同。ＤＮＡ加佐剂肌后进行体内电穿孔刺激诱导的Ｅｎｖ特异性体液免疫反应强度均显著高于应的ＤＮＡ加佐剂单独肌肉注射组。ＤＮＡ＆ＰＡ?ＩＭＥＰ组与ＤＮＡ＆ＢＣＧ?ＩＭ３３??

化刺激的化ＩＳｐｏｔ结果显示，ＤＮＡ＆ＰＡ?ＩＭＥＰ组诱导了最为理想的性Ｔ细胞免疫反应口８４９?±?１１７?ＳＦＵ／１０６细胞），总体Ｔ细胞免疫ＥＰ?组（１８６５?±１２６ＳＦＵ／１０６?细胞）提高了?１．５?倍，同时?Ｅｎｖ、Ｐｏｌ、Ｔ免疫反应强度也显著高于ＤＮＡ?ＩＭＥＰ组，表明与ＰＡ－ＭＳＨＡ佐样进行体内电穿孔刺激，ＤＮＡ质粒可诱导比单独免疫时更为反应。Ｐ〇ｒ持异柱细胞免疫反应结果显示，ＤＮＡ加佐剂肌注后体的免疫反应强度均显著高于其相对应的ＤＮＡ加佐剂单独肌肉注－１５?ＩＭＥＰ组诱导的Ｅｎｖ特异性细胞免疫恆答显著高于ＤＮＡ＆Ｌ－１加佐剂肌注后电穿孔组诱导的ＴＮＲ特异性细胞免疫应答显著高肌肉注射组，同时也均显著窩于ＤＮＡＩＭＥＰ组。??及ＶＴＫｇｐｅ不同免疫间隔小鼠实验??

【参考文献】：
期刊论文
[1]HIV-1 DNA疫苗的免疫效价及其与免疫剂量的相关性[J]. 郝彦玲,李平,何彦平,孙红岩,傅晶晶,邵一鸣.  中国生物制品学杂志. 2012(08)
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[3]用电穿孔方法研究H5N1禽流感病毒DNA疫苗对动物的免疫保护作用(英文)[J]. 张强哲,秦曦明,董海丽,梁荣,何宏轩,李希,姜北宇,刘湘军,段明星.  生物化学与生物物理进展. 2005(08)



本文编号：2908706