不同葡萄糖浓度对HBV表达HBsAg与HBeAg的影响

发布时间：2017-04-19 21:15

  本文关键词：不同葡萄糖浓度对HBV表达HBsAg与HBeAg的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:观察Hep G2.2.15细胞在不同浓度葡萄糖培养基条件下HBs Ag及HBe Ag的表达差异,并探讨其表达是否与PGC-1a相关,初步研究乙肝病毒与代谢之间的关系。方法:1)本实验通过体外培养Hep G2.2.15细胞,MTT法检测不同浓度葡萄糖培养基对Hep G2.2.15细胞生长率影响。2)ELISA法分别检测各组培养细胞上清液中HBs Ag、HBe Ag的表达量。3)荧光定量PCR检测不同葡萄糖浓度培养基下各组细胞PGC-1a m RNA的表达差异。结果:1)MTT法检测不同葡萄糖浓度培养基对Hep G2.2.15细胞生长率影响:高糖组(35mmol/L)葡萄糖培养基抑制细胞生长。除高糖组(35mmol/L)外,Hep G2.2.15细胞在培养24h与48h时各浓度组细胞与正常组比较差异无显著性(P0.05)。但在培养72h时,低糖组(2mmol/L)及无糖组细胞生长出现不同程度的抑制(P0.05)。2)HBs Ag及HBe Ag的动态变化:Hep G2.2.15表达HBs Ag在72h时出现高峰,HBe Ag的高峰出现在96h。在48小时可以观察到两种蛋白的表达量已达到接近高峰。3)观察不同葡萄糖浓度Hep G2.2.15表达HBs Ag、HBe Ag的量:低糖组(2mmol/L)及无糖组细胞表达HBs Ag、HBe Ag量分别为(2.474±0.118、2.458±0.135)及(2.667±0.129、2.603±0.179)较正常组(1.450±0.220、1.486±0.186)高,并且差异有显著性(P0.01)。低糖组(2mmol/L)与无糖组两两比较差异无显著性(P0.05)。而15mmol/L、25mmol/L组与正常组比较差异无显著性(P0.05)。4)定量PCR检测不同葡萄糖浓度培养下各细胞中PGC-1am RNA表达差异:Hep G2.2.15细胞在低糖组(2mmol/L)及无糖组PGC-1am RNA表达量分别为(1.584±0.134、1.312±0.199)较正常组(0.930±0.123)高,并且差异有显著性(P0.05),低糖(2mmol/L)及无糖组之间差异也有显著性(P0.05)。而15mmol/L、25mmol/L组与正常组比较无明显差异(P0.05)。结论:1)低糖可能增强HBV表达HBs Ag及HBe Ag。2)低糖改变时能促进PGC-1a的表达量。3)低糖可能通过促进PGC-1a的表达促进HBV表达HBs Ag及HBe Ag。
【关键词】：乙肝病毒 转录因子 代谢 过氧化体增值活化受体r 辅助活化因子a
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R512.62
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 第1章 绪论10-14
• 第2章 材料和方法14-24
• 1 主要实验仪器14-15
• 2 主要实验试剂15-17
• 3. 实验方法及步骤17
• 4. 主要液体的配制17-18
• 5．实验分组18
• 6．MTT 检测不同葡萄糖浓度培养 Hep G2.2.15 细胞的生长率18-19
• 7．检测 Hep G2.2.15 细胞上清液中 HBs Ag、HBe Ag 表达量的动态变化19
• 8. ELISA 法检测不同葡萄糖浓度细胞上清液中 HBs Ag、HBe Ag 的表达量差异19-20
• 9. 荧光定量 PCR 检测各组细胞 PGC-1am RNA 表达差异20-22
• 10 统计学方法22-24
• 第3章 实验结果24-30
• 1. MTT 法检测各组细胞存活率24-25
• 2. Hep G2.2.15 细胞分泌 HBs Ag 及 HBe Ag 动态变化25-26
• 3. 不同浓度葡萄糖对 Hep G2.2.15 表达 HBs Ag 及 HBe Ag 的影响26-27
• 4. 荧光定量 PCR 检测各组细胞 PGC-1am RNA 表达差异27-30
• 第4章 讨论30-36
• 第5章 结论36-38
• 参考文献38-42
• 文献综述42-51
• 参考文献47-51
• 研究成果51-52
• 致谢52

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本文编号：317136