日本血吸虫潜在药物靶点β-碳酸酐酶的表达与鉴定

发布时间：2017-04-19 21:17

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【摘要】：目的原核表达日本血吸虫(Schistosoma japonicum)潜在的药物靶点β-碳酸酐酶(β-CA)并测定其催化活性。方法根据β-CA保守序列,在日本血吸虫基因组中鉴定β-CA序列,核酸序列全合成后将其导入原核表达系统进行融合表达。SDS-PAGE及Western blotting鉴定表达蛋白后,采用Ni亲和层析方法纯化目的蛋白,并测定碳酸酐酶活性。结果c DNA序列Sjp_0056790.1具有β-CAs的保守序列;成功将该核酸序列导入重组表达载体p ET-32a(+)-Sja CA中;SDSPAGE和Western blotting检测结果显示融合蛋白分子量大小约为38 k Da;碳酸酐酶活性测定结果显示该蛋白具有碳酸酐酶活性,且该活性受乙酰唑胺抑制。结论 Sjp_0056790.1编码日本血吸虫β-CA,本研究成功表达了具有催化活性的日本血吸虫的β-CA,为后续的药物筛选奠定了基础。
【作者单位】： 第二军医大学病原生物学教研室;
【关键词】： 日本血吸虫 β-碳酸酐酶(β-CA) 药物靶点 表达 活性测定
【基金】：国家科技重大专项(2012ZX10004220) 卫生行业科研专项(201202019)
【分类号】：R383.24
【正文快照】： 血吸虫病是一种严重危害人类健康的人兽共患寄生虫病,在全球76个国家和地区广泛流行。我国主要流行的是日本血吸虫病,分布于长江流域及其以南地区,是我国重要的公共卫生问题之一。吡喹酮是目前治疗血吸虫病的首选药物,使用至今已有30多年历史,安全高效。然而,越来越多的证据显

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