呼吸道合胞病毒对结肠癌的溶瘤作用研究

发布时间：2017-05-12 08:20

  本文关键词：呼吸道合胞病毒对结肠癌的溶瘤作用研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:结肠癌作为消化道肿瘤的一种常见疾病,其发病率在所有恶行肿瘤中排名第三,且呈逐年上升趋势,发现和治疗结肠癌势在必行。RSV为单股负链RNA病毒,既往研究发现其对部分肿瘤细胞表现出溶瘤促凋亡效果,但由于同种病毒对不同组织细胞感染力和杀伤力不同,因此本研究旨在探讨RSV对结肠癌细胞是否具有溶瘤作用。方法:培养和纯化RSV并检测其滴度,MTT法检测RSV对结肠癌细胞SW480、HT29及LOVO生长抑制作用,显微镜下观察细胞病变及噬斑法测病毒滴度,Annexin V-FITC/PI双标法检测RSV对HT29细胞及SW480和LOVO细胞的凋亡诱导作用,同时结肠癌裸鼠肿瘤模型中观察瘤内接种RSV后肿瘤体积变化。结果:MTT结果提示:RSV明显抑制结肠癌细胞SW480及HT29细胞生长,这种抑制作用呈现明显的剂量及时间依赖性,对人结肠上皮细胞LOVO无抑制作用;接种病毒后SW480及HT29细胞出现不同程度的圆缩、脱落现象,随接种时间和接种剂量变化,病变愈加显著,LOVO细胞接种病毒后病变不明显;RSV病毒能够在SW480、HT29细胞中有效复制,在LOVO细胞中不能复制;Annexin V-FITC/PI双标法结果提示:RSV可有效诱导SW480、HT29凋亡,且随时间延长凋亡细胞增加,对LOVO细胞无促凋亡作用;裸鼠结肠癌模型中,与对照组比较瘤内接种RSV显示出明显的肿瘤抑制作用,统计学差异显著(P0.05)。结论:1.RSV对结肠癌细胞SW480、HT29具有诱导促凋亡作用,对LOVO作用不显著;2.RSV能在结肠癌细胞SW480、HT29中有效复制,在LOVO中不能有效复制;3.RSV对不同细胞作用效果不同,其具体机制有待进一步探讨,提示RSV可能对多数肿瘤有杀伤作用。
【关键词】：结肠癌 人呼吸道合胞病毒 溶瘤 凋亡
【学位授予单位】：河南科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.35;R511
【目录】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-8
• 第1章 绪论8-24
• 1.1 研究背景8-21
• 1.1.1 溶瘤病毒及其发展史8-9
• 1.1.2 溶瘤病毒的分类9
• 1.1.3 溶瘤病毒主要作用机制9-11
• 1.1.4 溶瘤病毒对肿瘤细胞的靶向性11-12
• 1.1.5 溶瘤病毒的杀伤性12-14
• 1.1.6 溶瘤病毒研究现状14-18
• 1.1.7 技术瓶颈18-19
• 1.1.8 问题与展望19-21
• 1.1.9 结语21
• 1.2 研究目的21
• 1.3 研究意义21-24
• 第2章 材料与方法24-33
• 2.1 实验材料24-26
• 2.1.1 细胞系及病毒株24
• 2.1.2 主要试剂24
• 2.1.3 主要仪器24-25
• 2.1.4 主要溶剂配制25-26
• 2.2 实验方法26-33
• 2.2.1 Hep2细胞的培养、传代及冻存26
• 2.2.2 病毒扩增培养及纯化26-27
• 2.2.3 病毒滴度检测27-28
• 2.2.4 SW480细胞、HT29细胞及LOVO细胞的培养、传代及冻存28-29
• 2.2.5 MTT实验29-30
• 2.2.6 细胞CPE效应30
• 2.2.7 病毒复制能力检测30-31
• 2.2.8 Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡31-32
• 2.2.9 动物实验32
• 2.2.10 统计分析32-33
• 第3章 结果33-41
• 3.1 MTT法检测呼吸道合胞病毒对结肠癌细胞的毒性作用33-34
• 3.2 病毒CPE效应34-36
• 3.3 病毒体外复制36-38
• 3.4 Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡38-39
• 3.5 裸鼠动物实验结果39-41
• 第4章 讨论41-45
• 第5章 结论45-46
• 参考文献46-50
• 缩略语词汇表50-51
• 致谢51-52
• 攻读学位期间的研究成果52

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 马正海;;溶瘤病毒靶向肿瘤的分子机制[J];细胞生物学杂志;2009年06期

2 苏晓三;张蕾;;细胞荷载溶瘤病毒治疗肿瘤的研究进展[J];肿瘤;2011年01期

3 梅赞;朱凤仪;;干细胞荷载溶瘤病毒治疗胶质瘤的研究进展[J];医学综述;2011年21期

  本文关键词：呼吸道合胞病毒对结肠癌的溶瘤作用研究，，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：359275