抗HTNV中和性鼠/人嵌合抗体基因向植物转化研究

发布时间：2024-01-28 08:07

　　在由农杆菌介导的叶盘法转化烟草的研究中,将含有重组质粒的农杆菌过夜培养后按1∶100接种于新鲜的LB培养液中培养6h至OD600≈0.6时,取菌液经梯度稀释后分别对大小约0.5cm2的烟草叶片进行不同时间浸染。结果表明,用经20倍稀释后的菌液浸染的烟草叶片其转化率达97%以上,且不同时间浸染的处理间无显著差异,培养基中激素浓度以6-BA 1.5mg/L IAA 0.5mg/L为宜。

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 引言
    1.1 肾综合征出血热 (HFRS) 的研究意义及其进展
    1.2 植物转化的影响因素
        1.2.1 菌液浓度和浸染时间对植物转化的影响
        1.2.2 共培养对植物转化的影响
        1.2.3 乙酰丁香酮 (AS) 对植物转化的影响
        1.2.4预培养对植物转化的影响
        1.2.5其他影响因素
    1.3 拟开展研究的内容及方法
2 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 菌种
        2.1.3 质粒
    2.2 实验仪器
    2.3 实验试剂
        2.3.1 质粒提取试剂
        2.3.2 抗生素:利福霉素 (rif)
        2.3.3 转化液
        2.3.4培养基
    2.4 实验方法
        2.4.1 制备农杆菌转化子及鉴定
            2.4.1. 1 农杆菌EHA105的培养
            2.4.1. 2 农杆菌感受态细胞的制备
            2.4.1. 3 重组质粒向农杆菌感受态细胞的转化 (冻融法)
3 实验结果
    3.1 农杆菌的转化提取及鉴定
    3.2 农杆菌介导的烟草叶片转化
        3.2.1 菌悬浮液浓度及浸染时间对出愈率的影响
        3.2.2 共培养时间对出愈率的影响
        3.2.3 激素浓度对出愈的影响
4 讨论



本文编号：3887350