CYP1A1和GSTP1基因启动子区CpG岛甲基化与抗结核药物性肝损伤的关系研究

发布时间：2017-05-25 18:01

  本文关键词：CYP1A1和GSTP1基因启动子区CpG岛甲基化与抗结核药物性肝损伤的关系研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的通过对结核病患者血浆细胞色素P 450(CYP)1A1和谷胱甘肽S-转移酶(GST)P1基因启动子区Cp G岛甲基化分析,探讨CYP1A1和GSTP1基因甲基化状态改变与抗结核药物所致肝损伤(anti-tuberculosis drug-induced hepatic injury,ADIH)的关系,同时也为ADIH的早期发现及优化治疗方案提供依据。方法1研究对象:采用1:1配比病例对照研究,严格按照病例与对照的纳入及排除标准,选择127例经抗结核治疗6个月内发生肝损伤的患者为病例组,127例未发生肝损伤的患者为对照组。2现场调查:查阅病历获取研究对象的性别、年龄、文化程度及职业等一般情况;烟酒嗜好;结核病严重程度、既往病史及服药史;抗结核化疗方案及用药前后肝功能检查等情况。同时收集患者血液标本于-80℃储存备用。3实验室检测:采用盐析法提取外周血细胞基因组DNA,聚合酶链反应片段长度多态性(RFLP-PCR)法检测多态性;采用血浆游离DNA提取试剂盒提取血浆游离DNA,游离DNA经甲基化修饰试剂盒修饰后采用甲基化特异PCR(MSP)法检测CYP1A1和GSTP1基因启动子区Cp G岛甲基化水平。4统计学分析:研究对象一般危险因素、CYP1A1和GSTP1基因启动子区Cp G岛甲基化状态与ADIH的关系、ADIH影响因素的多因素分析、CYP1A1和GSTP1基因甲基化交互作用的分析均采用条件Logistic回归分析,计算OR值及其95%CI。以上统计分析均双侧检验,规定检验水准α=0.05。结果1一般危险因素的分析:病例组和对照组中婚姻、文化程度、职业、BMI、吸烟、饮酒、结核病类型等因素的分析结果显示,饮酒可能为ADIH发生的危险因素,其他因素在两组分布的差异未见统计学意义。2 CYP1A1和GSTP1甲基化与ADIH的关系:研究结果显示病例组中CYP1A1和GSTP1基因甲基化频率显著高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。为排除两基因位点多态性的影响,对病例组CYP1A1 MspⅠ和GSTP1 Ile105Val位点多态性与甲基化的相关性进行分析,结果未发现两者之间存在关联,故本研究可排除该基因位点多态性对甲基化的影响。最后采用多因素条件Logistic回归分析调整了饮酒、CYP1A1和GSTP1基因多态性因素的影响,发现CYP1A1和GSTP1基因启动子区Cp G岛高甲基化仍是ADIH发生的危险因素(OR=1.962,2.660)。3 CYP1A1和GSTP1基因甲基化交互作用分析:对CYP1A1和GSTP1基因各甲基化型别之间是否存在交互作用进行了分析,研究结果显示CYP1A1和GSTP1基因均发生甲基化及CYP1A1或GSTP1单一基因甲基化,与均未甲基化相比,差异均具有统计学意义(P0.05),提示CYP1A1和GSTP1基因甲基化之间存在协同作用,可作为诊断及治疗ADIH的潜在指标。结论1 CYP1A1和GSTP1基因启动子区CpG岛甲基化与ADIH的发生有关,具有高甲基化特征的患者是发生ADIH的高危人群。2 CYP1A1和GSTP1基因甲基化型别之间存在协同作用,CYP1A1和GSTP1基因均发生甲基化者发生ADIH的危险性显著增加。
【关键词】：细胞色素P450 1A1 谷胱甘肽S-转移酶P1 甲基化 抗结核药 肝损伤
【学位授予单位】：华北理工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R52
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 引言10-12
• 第1章 实验研究12-37
• 1.1 研究内容与方法12-20
• 1.1.1 主要材料12-13
• 1.1.2 研究对象13-14
• 1.1.3 现场调查14-15
• 1.1.4 血细胞基因组DNA的提取15
• 1.1.5 血浆游离DNA的提取15-16
• 1.1.6 血浆游离DNA的修饰与回收16-17
• 1.1.7 CYP1A1和GSTP1基因多态性检测17-18
• 1.1.8 CYP1A1和GSTP1基因启动子区CpG岛甲基化检测18
• 1.1.9 资料处理与分析18-19
• 1.1.10质量控制19-20
• 1.2 结果20-27
• 1.2.1 研究对象基本特征20
• 1.2.2 ADIH一般危险因素的分析20-22
• 1.2.3 CYP1A1和GSTP1基因启动子区CpG岛甲基化与ADIH的关系22-25
• 1.2.4 ADIH 影响因素的多因素分析25-26
• 1.2.5 CYP1A1和GSTP1基因启动子区CpG岛甲基化交互作用分析26-27
• 1.3 讨论27-32
• 1.3.1 药物代谢酶参与ADIH发病研究现状27-28
• 1.3.2 本研究设计亮点28
• 1.3.3 ADIH一般危险因素结果分析28-29
• 1.3.4 CYP1A1和GSTP1基因多态性结果分析29
• 1.3.5 CYP1A1和GSTP1基因启动子区CpG岛甲基化结果分析29-31
• 1.3.6 CYP1A1和GSTP1基因启动子区CpG岛甲基化交互作用分析31-32
• 1.3.7 存在问题及展望32
• 1.4 小结32
• 参考文献32-37
• 第2章 综述 药物代谢酶与抗结核药物性肝损伤关联的研究进展37-50
• 2.1 ADIH的危险因素37-38
• 2.2 药物代谢酶参与ADIH发病的机制38-39
• 2.3 药物代谢酶基因多态性与ADIH的关联39-42
• 2.3.1 NAT2基因多态性与ADIH的关系39-40
• 2.3.2 CYP2E1基因多态性与ADIH的关系40-41
• 2.3.3 GSTM1、GSTT1基因多态性与ADIH的关系41-42
• 2.3.4 其他基因与ADIH的关系42
• 2.4 药物代谢酶DNA甲基化与ADIH的关联42-44
• 2.4.1 表观遗传学机制42-43
• 2.4.2 CYP2E1基因DNA甲基化与ADIH的关系43
• 2.4.3 GSTP1基因DNA甲基化与ADIH的关系43-44
• 2.5 存在问题及展望44
• 2.6 结束语44
• 参考文献44-50
• 结论50-51
• 附录 抗结核药物性肝损伤易感因素调查表51-53
• 致谢53-54
• 导师简介54-55
• 作者简介55-56
• 学位论文数据集56

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 黄汉平;张丽;;抗结核药物对慢性肝病肺结核患者肝功能的影响[J];临床内科杂志;2007年05期

2 杨瑞红,何权瀛,卢冰冰,张荣葆;谷胱甘肽S-转移酶M1、T1基因多态性与慢性阻塞性肺疾病易感性关系的研究[J];中国呼吸与危重监护杂志;2004年02期

3 李健;马军;;抗结核药物的肝毒性[J];胃肠病学和肝病学杂志;2008年08期

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 谢鹏鸣;CYP450-2E1基因多态性与抗结核药物所致肝损害关联研究[D];新疆医科大学;2012年

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本文编号：394516