凝集素DSA识别的乙肝相关肝硬化患者唾液中特异性糖链结构的研究

发布时间：2024-07-10 19:08

　　研究背景:慢性乙肝是由乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus,HBV)引起的,以肝脏炎性病变为主的一类常见疾病。我国是慢性肝炎特别是乙型肝炎(HBV-induced chronic hepatitis,HB)的高流行区,约2%¹0%的患者可转化为肝硬化(Hepatic Cirrhosis,HC)。目前,HC的各种检测方法分别受其技术特点的限制,分别存在特异性低、取样不便和不能早期诊断等缺陷。本实验室在前期研究中采用凝集素芯片检测技术,分析了491例HBV诱发的肝炎、肝硬化和肝癌患者和156例健康志愿者(Healthy Volunteer,HV)的唾液样本,有14个凝集素(例如MAL-II,UEA-I和DSA)显示了它们识别的唾液糖蛋白糖型在肝病发生发展过程中发生了显著变化,制备出了一款针对HBV诱发的肝病检测的小型凝集素芯片,并构建了数学诊断模型。本研究首先运用这款凝集素芯片进行盲测,验证数学诊断模型的准确性,并采用唾液芯片和DSA凝集素印迹技术验证肝病患者唾液中的糖蛋白糖链结构的差异,最后利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术(MALDI-TOF/T...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1.乙型肝炎病毒Dane颗粒结构示意图

西北大学硕士学位论文肝炎病毒[10]。HBV也可在孕妇分娩期间从表现出的症状主要包括皮肤，眼睛和尿液出[11]。型的DNA病毒，具有逆转录酶活性，属于因型，且地理分布差异较大。HBV病毒有四心抗原HBcAg组成的核衣壳和核心蛋白、蛋白和具有转录反式激活潜力的聚合酶等。....

图2.肝病发展简易流程图

西北大学硕士学位论文Cell）可以诱导MHCI型基因下调的细胞和应激诱导的配体过表达细胞的凋亡。由于细胞外基质结构发生改变而导致的肝细胞纤维化，使得自然杀伤细胞与肿瘤和星状细胞靶标分离，细胞功能降低，肿瘤监测功能失常[22]。虽然几乎没有由于家族遗传而患病的肝癌患者，但已经....

图3.凝集素芯片点样阵列

完成后用离心机，500rpm，25℃离心10min，离心干燥，最后放入常温干燥箱中保存。芯片的点制凝集素点样液依次加入384孔板中，设计好凝集素芯片yer48点样仪进行凝集素芯片的点制。针对HBV诱发的点样阵列如图3所示，阵列中包括内参探针PTL-Ⅱ，1EA-....

图4.肝病患者唾液芯片设计示意图

本的准备唾液采集前用生理盐水漱口三次，以确保口腔卫生；采集时舌分泌的唾液样本至少1mL至离心管，并于冰上暂时保存；离心机弃去沉淀，留取清液并测定蛋白浓度，加入1μL蛋白酶抑制剂性，以保持唾液样本中蛋白的活性，处理完成后于-80℃冰箱片的设计HB，HC和HCC四组样本....

本文编号：4004592