高通量ELISA检测HBV系统化标准化研究及重庆地区HBV流行病学调查分析

发布时间：2017-05-30 17:01

  本文关键词：高通量ELISA检测HBV系统化标准化研究及重庆地区HBV流行病学调查分析，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：高通量酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)的检测是临床实验室最常用的检测乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)血清学标志物的方法,具有灵敏度高、特异型好、价格低廉的优势,但同时又存在操作的重复性和准确性差问题,影响着结果的可靠性。在本研究中我们通过高通量ADDCARE1100全自动酶免工作站的仪器硬件检测和配套试剂的性能评价,来确保ADDCARE1100全自动酶免工作站检测结果的可靠性。仪器硬件参数检测包括加样器加样精度测量、洗板残留量的测量和孵育微板温度的测量;配套试剂的性能评价包括:以Architect I2000全自动化学发光免疫分析仪为参考方法,对ADDCAER1100全自动酶免工作站进行HBV血清学标志物检测的方法学对比,同时进行ADDCARE1100全自动酶免工作站的重复性试验,通过上述试验来进行ELISA检测系统检测过程中的系统化和标准化研究。同时收集2013.6-2014.6重庆市主城和区县的4家医院不同方法学检测HBV的血清学标志物和被检测者基本信息,建立重庆市乙型肝炎病毒信息标本库,对重庆市乙型肝炎病毒进行流行病学调查分析,本研究结果如下:1.ADDCARE1100全自动酶免工作站硬件设备共有12个加样器,每个加样器重复10次,测量次数为12×10=120次。加样器的12个通道精度都在100±2μl内,重复性符合国家标准CV≤0.75%.。3台洗板机的洗板残留量都到达每孔平均残留量≤2μl要求的结果;32块微板在不同时间段2次的测量结果符合温度T=37℃±0.5℃的要求2.方法学对比:两种检测仪器检测乙型肝炎病毒表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)、乙型肝炎病毒表面抗体(hepatitis B surface antibody,HBsAb)、乙型肝炎病毒e抗原(hepatitis B e antigen,HBeAg)、乙型肝炎病毒e抗体(hepatitis B e antigen,HBeAb)、乙型肝炎病毒核心抗体(hepatitis B core antibody,HBcAb)的总符合率分别为99.0%,99.5%,99.5%,98.0%,100.0%;阳性符合率分别为98.0%,100.0%,99.0%,97.0%,100.0%;阴性符合率分别为100.0%,99.0%,100.0%,99.0%,100.0%;Kappa检验系数K分别为0.98,0.99,0.99,0.96,1.00。3.重复性试验:ADDCARE1100检测HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb在±20%浓度的临界值样本阳(阴)性率均≥95%,95%可信区间分别为:96.6%-99.5%,97.6%-99.5%,97.6%-99.5%,94.7%-99.5%,98.6%-99.5%。4.HBV流行病学调查结果:2013.6-2014.6重庆市大坪医院检验科、南川区人民医院检验科、黔江中心医院检验科、合川区中心医院检验科共检测乙型肝炎血清学标志物(HBs Ag、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb)149762例份标本,共得出31种血清学组合模式;以为HBsAb(+)、HBsAb(+)HBcAb(+)、标志物全阴,三种模式为主,占所检测人数的18.02%,17.55%,15.46%。5.HBsAg阳性的性别分布情况:人群中男性HBsAg的阳性率16%,女性HBsAg阳性率为9.82%。6.四个年龄段的HBs Ag阳性、HBsAb阳性分布水平:HBsAg阳性率0-4岁年龄段为4.53%:HBsAg的阳性率5-14岁的年龄段最低为3.48%,HBsAg阳性率15-59岁年龄段最高为14.15%,HBsAg阳性率60岁以上年龄段为10.37%;4个年龄段的HBsAg阳性率有统计学差异,P0.01;HBsAb阳性率0-4岁年龄段的最高为65.38%,HBs Ab阳性率5-14岁的最低为48.48%,HBsAb阳性率15-59岁年龄段为50.65%,HBsAb阳性率60岁以上年龄段为63.07%;4个年龄段的HBsAb分布有统计学差异,P0.01.7.重庆主城和区县HBsAg阳性率的分布情况;共有4家医院参加的HBV血清学的检测,主城区的HBs Ag阳性率是10.23%,区县3家医院HBsAg阳性率是13.78%,主城区和区县的HBsAg阳性率有统计学差异,P0.01。总结:ADDCARE1100全自动酶免工作站的硬件参数检测符合国家标准,与Architect I2000全自动化学发光免疫分析仪共同检测HBV血清学标志物的结果一致性很好;ADDCARE1100全自动酶免工作站检测HBV血清学标志物在临界值±20%的浓度内能得到稳定结果。该仪器的的检测符合ELISA检测系统对于准确性高、重复性好的临床要求,以及ELISA检测系统的规范化操作要求,可用于临床实验室对于标本的检测;重庆市HBV流行病学的调查总体符合2006年的全国流行病学调查的报告:儿童和青少年的HBsAg阳性率最低,15至59岁人群HBsAg阳性率最高,表明年龄越小,HBsAg阳性率下降幅度越大,儿童HBsAg的阳性率明显降低,我国HBsAg阳性率和HBV传播方式已发生明显改变[1];为重庆市HBV流行的基本特征及预后转归等提供重要的临床依据,并为HBV的的临床防治提供可靠的科学依据。
【关键词】：ELISA 性能评价 定性试验 HBV 血清学标志物 流行病学调查
【学位授予单位】：第三军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R446.6;R512.62
【目录】：

• 英文缩写一览表4-5
• 英文摘要5-8
• 中文摘要8-10
• 第一章 前言10-13
• 1.1 选题缘由10-12
• 1.2 研究背景12
• 1.3 本实验的研究意义及主要内容12-13
• 第二章 高通量ELISA检测HBV系统化标准化研究13-25
• 2.1 ADDCARE1100全自动酶免工作站的硬件检测13-16
• 2.1.1 材料与方法13-15
• 2.1.2 结果15-16
• 2.2 ADDCAER1100全自动酶免工作站实验性能评价16-25
• 2.2.1 材料与方法16-17
• 2.2.2 结果17-24
• 2.2.3 讨论24-25
• 第三章 重庆地区HBV流行病学调查分析25-36
• 3.1 材料和方法25-26
• 3.2 结果26-34
• 3.3 讨论34-36
• 全文总结36-37
• 参考文献37-40
• 文献综述 基层医生应该如何筛查，评估感染HBV的患者40-46
• 参考文献44-46
• 攻读学位期间研究成果46-47
• 致谢47

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 李金明;血液感染性疾病标志物筛检中应重视的若干问题[J];中华检验医学杂志;2005年06期

  本文关键词：高通量ELISA检测HBV系统化标准化研究及重庆地区HBV流行病学调查分析，由笔耕文化传播整理发布。

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本文编号：407518