乙肝相关性肝细胞肝癌巴塞罗那分期的血清代谢轮廓分析

发布时间：2017-06-11 13:07

  本文关键词：乙肝相关性肝细胞肝癌巴塞罗那分期的血清代谢轮廓分析，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的运用超高效液相色谱与质谱联用代谢组学技术,探寻乙肝相关性肝细胞肝癌(HCC)患者巴塞罗那分期不同阶段的血清中的特异性小分子代谢物,建立区分模型,进而对这些物质所涉及的代谢通路进行分析,评价其对乙肝相关性肝细胞肝癌诊断及病程进展监测的价值,以达到辅助临床诊断,寻找新的治疗靶点,进行“个体化”诊疗的目的。方法选取2013年11月—2015年1月于天津市第三中心医院肝胆内、外科确诊的HBV相关性HCC初发病例75例,根据巴塞罗那肝癌分期标准将其分为:(1)可进行根治性治疗的早期组(A组)26例,(2)可经动脉化疗性栓塞治疗的中期组(B组)23例,(3)对症支持治疗的晚期组(C组)26例;对照组包括:乙肝肝硬化组20例;健康对照组20例。采用UPLC-MS技术平台对所有样本进行检测,后利用分析软件Mzmine2.0对所得数据进行预处理和归一化;后利用SIMCA软件进行分析,建立正交偏最小二乘判别分析模型,再根据模型中变量投影重要性值(VIP)、VIP图及系数图对代谢离子进行初步筛选;然后在利用SPSS 17.0统计学软件对上步得到的初筛离子进行非参数检验,排除P0.05的变量进而对潜在代谢标志物进行筛选,最后通过ROC曲线评价所鉴定出的特征性代谢物对巴塞罗那分期不同阶段的HBV相关性HCC的诊断价值。结果(1)检测了20个质控样品,建立了含有一个主成份的PCA判别模型打分图(R2X=16.4%,Q2=5.99%),所有质控物均处于?±2SD范围内,其中有18个质控品符合质控品要求规定,合格率为90%。(2)建立了科学的不同巴塞罗那分期HBV相关性HCC患者血清代谢组学主成分分析模型和OPLS-DA模型,OPLS-DA模型解释率R2X为67.2%,R2Y为82%,预测率Q2Y为61.1%。(3)从OPLS-DA模型中筛选出A组与C组有统计学差异的51个特征代谢物,经Wilcoxon秩和检验有20个在各组间具有统计学差异(P0.05)。其中:6个在肝硬化组和HCC各组中均有差异;7个在健康对照组和HCC各组中均有差异;HCC各组间均具有统计学差异的有2个;A组与B、C两组有差异的9个;A、B组与C组有差异的8个。(4)鉴定出上述20种与肝脏肿瘤发生发展高度相关的特征代谢离子,主要为溶血磷脂酰胆碱类、氨基酸类、甘氨胆酸、异油酸等。(5)Lyso PC(18:2(9Z,12Z))、Lyso PC(P-16:0)、Asparaginyl-Proline、异油酸四种代谢离子的ROC曲线下面积均大于AFP,优于AFP对肝癌特别是早期肝癌的诊断能力;L-Aspartyl-4-phosphate、Lyso PC(20:5(5Z,8Z,11Z,14Z,17Z))两种离子在HCC早、中组比较中的曲线下面积比AFP大;而在中、晚期组比较中较小。结论本研究利用具有良好分辨率和客观性的UPLC-MS代谢组学研究平台以及合理的统计学分析方法,成功地筛选出了可以诊断肿瘤发生、反映肿瘤发展不同阶段并具有较高诊断效能的特异性代谢标志物。了解这些代谢物质在HBV相关性HCC患者体内的变化趋势,可以对患者疾病的诊断以及病程的发展起到良好的监测作用,并可为临床“个体化”诊疗方案的制定提供有力支持。
【关键词】：乙肝 肝细胞癌 代谢组学 巴塞罗那分期
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.7;R512.62
【目录】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 缩略语/符号说明10-12
• 前言12-17
• 研究现状、成果12-15
• 研究目的、方法15-17
• 1 材料和方法17-24
• 1.1 实验对象17-18
• 1.1.1 课题研究对象的筛选标准17-18
• 1.1.2 实验样本及数据收集18
• 1.2 仪器和试剂18-20
• 1.2.1 实验仪器18-19
• 1.2.2 主要试剂19-20
• 1.3 实验方法20-23
• 1.3.1 标本预处理20-21
• 1.3.2 上机分析21-22
• 1.3.3 质控物制备22-23
• 1.4 数据处理23-24
• 1.4.1 数据前处理23
• 1.4.2 统计学分析23
• 1.4.3 潜在代谢标志物鉴定23-24
• 2 结果24-37
• 2.1 实验组与对照组一般临床资料比较24-25
• 2.2 实验质控图25-26
• 2.3 实验组与对照组血清代谢色谱图26-27
• 2.4 数据前处理结果27-28
• 2.5 PCA模型和OPLS-DA模型的建立与分析28-31
• 2.5.1 PCA模型的构建28-29
• 2.5.2 OPLS-DA模型的构建29-31
• 2.6 代谢物离子的初筛与确证31-33
• 2.7 潜在代谢标志物的物质鉴定33-35
• 2.8 特征代谢离子的诊断效能评估35-37
• 2.8.1 用于HCC与肝硬化鉴诊的特征代谢离子效能评估35-36
• 2.8.2 用于HCC巴塞罗那分级的特征代谢离子效能评估36-37
• 3 讨论37-46
• 结论46-48
• 参考文献48-52
• 发表论文和参加科研情况说明52-53
• 附录53-57
• 综述 乙肝相关性肝细胞肝癌血清标志物的研究进展57-71
• 综述参考文献66-71
• 致谢71

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 赵红霞;郑国军;史琼英;樊燕;王永忠;;AFP-L3和PIVKA-Ⅱ在肝细胞癌诊断中的价值[J];北方药学;2013年10期

  本文关键词：乙肝相关性肝细胞肝癌巴塞罗那分期的血清代谢轮廓分析，，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：441652