1例慢性HIV-1感染者体内CD4结合位点特异性记忆B细胞分选及抗体表达研究

发布时间：2017-06-28 10:14

  本文关键词：1例慢性HIV-1感染者体内CD4结合位点特异性记忆B细胞分选及抗体表达研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的通过抗原特异性记忆B细胞(Memory B)分选、抗体基因克隆表达和鉴定方法,从艾滋病病毒1型(HIV-1)感染者中获得HIV-1中和抗体,并进一步探讨获得抗体的特征。方法通过检测血浆中和抗体活性和表位筛选,挑选出1例含有CD4结合位点(CD4bs)特异性抗体的慢性HIV-1感染者。采用一对含有/缺失CD4-bs的探针RSC3/ΔRSC3进行Memory B分选,获得抗体可变区基因后进行抗体的表达纯化,并检验所得抗体的结合能力和中和能力。结果从9×106外周血单核淋巴细胞(PBMCs)中分离得6个特异性Memory B。通过反转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别扩增出3对重链和轻链可变区基因,配对得到3个抗体,其中有一个抗体具有HIV-1CD4bs结合能力。中和实验表明,这个抗体能中和毒株SF162[50%抑制浓度(IC50=0.89μg/mL]。抗体可变区基因家系分析表明,该抗体属于IGHV1-18家系,重链可变区(VH)自体突变率为12%,低于广谱中和抗体VRC01VH的自体突变率(32%)。结论建立的单克隆特异性Memory B分选方法,可以获得有中和能力的抗体。该平台有希望获得具有我国自主知识产权的广谱中和抗体,并为开发抗体药物和设计新型免疫原提供技术支持。
【作者单位】： 中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心传染病预防控制国家重点实验室;
【关键词】： 艾滋病病毒型 广谱中和抗体 CD结合位点 单个B细胞分选
【基金】：国家十二五重大传染病防治研究项目(2014ZX10001001-002) 传染病预防控制国家重点实验室基金(2012SKLID103;2015SKLID506) 中国疾病预防控制中心青年基金(2013A102)~~
【分类号】：R512.91
【正文快照】： Supported by the National Science and Technology Major Project(2014ZX10001001-002);SKLID Developmentgrant(2012SKLID103,2015SKLID506);China CDC Youth Fund(2013A102)近来研究表明,一些慢性艾滋病病毒1型(Hu-man immunodeficiency virus,HIV-1)感染者体内能够产生较

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本文编号：493472