VEGF、CD34在肝泡状棘球蚴浸润性生长中的作用

发布时间：2017-06-28 12:07

  本文关键词：VEGF、CD34在肝泡状棘球蚴浸润性生长中的作用，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:研究VEGF、CD34在肝泡状棘球蚴浸润性生长中的作用。方法:1.建立泡球蚴原头节-人肝癌Hep G2细胞共培养体系,共培养一周后,将其分为三组:去铁敏缺氧诱导组、DMSO溶剂组、常规培养组,继续培养24小时后,伊红染色法计数原头节的活力,Elisa法检测泡球蚴原头节HIF1-α、VEGF、CD34的表达,2.采用随机数字表法将60只长爪沙鼠随机分为实验组和假手术对照组,实验组采用开腹直视法接种泡球蚴原头节,对照组接种等体积的PBS。分别在接种后的第20d、40d、60d、80d、100d在各组中随机取六只沙鼠,颈椎脱臼法处死沙鼠,分别取泡球蚴组织、泡球蚴周围0.5cm处肝组织以及正常肝组织,采用HE染色法观察泡球蚴组织病理学变化,采用免疫组化检测VEGF、CD34在各样本中的表达情况。结果:继续培养24小时后,正常培养组、DMSO溶剂组、去铁敏诱导组头节活力分别为:(79.90±1.31)%、(78.58±2.52)%和(78.45±1.65)%,各组差异无统计学意义(P0.05)。正常培养组、DMSO溶剂组、去铁敏诱导组HIF1-α的表达情况分别为:(852.00+124.41)pg/m L、(806.20±118.51)pg/m L和(1168.20±93.59)pg/m L;VEGF的表达情况分别为:(158.28±29.24)pg/m L、(157.49±26.88)pg/m L和(222.36±18.87)pg/m L;CD34的表达情况分别为:(605.40±49.95)pg/m L、(592.20±51.91)pg/m L和(873.60±61.15)pg/m L;与正常培养组及DMSO组相比,HIF1-α、VEGF、CD34的表达差异有统计学意义(均P0.05);DMSO组和正常培养组相比,HIF1-α、VEGF、CD34差异均无统计学意义(均P0.05)。感染泡球蚴沙鼠肝脏中均见大小不等的团块状囊泡组织,部分播散至腹腔。在感染的各时间点,泡球蚴组织中均可见到MVD-CD34和VEGF的表达,定位于肝泡球蚴组织“外囊”囊壁内皮细胞的细胞浆。在感染后第20 d、40 d、60 d、80 d和100 d时,泡球蚴组织中MVD分别为(9.83±3.87)、(25.33±6.71)/HP、(34.50±5.50)/HP、(37.67±5.71)/HP和(44.67±4.93)/HP,与泡球蚴周围肝组织〔0/HP、(1.17±0.98)/HP、(3.50±1.38)/HP、(5.83±2.71)/HP、(8.83±2.48)/HP〕和正常肝组织(均为0)相比,差异均有统计学意义(P0.05)。各时间点泡球蚴组织中VEGF免疫组化评分分别为(2.95±0.46)分、(3.90±0.68)分、(4.27±1.05)分、(5.33±0.95)分和(4.50±0.81)分,与泡球蚴周围肝组织〔(1.07±0.63)分、(1.38±0.75)分、(1.55±0.83)分、(1.67±0.47)分、(2.10±0.55)分〕和正常肝组织〔(1.02±0.83)分、(1.12±0.63)分、(1.26±0.26)分、(1.20±0.74)分、(1.21±0.28)分〕相比,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:1.成功建立了泡球蚴体外缺氧培养模型,缺氧24小时对泡球蚴原头节活力无影响,2.缺氧可以上调泡球蚴原头节HIF1-α、VEGF、CD34的表达;3.VEGF、CD34在泡球蚴组织中高表达,可能与泡球蚴组织血管生成有关,4.血管新生可能是泡球蚴浸润性生长的机制之一。
【关键词】：泡状棘球蚴 血管内皮生长因子 CD34 血管生成
【学位授予单位】：石河子大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R532.31
【目录】：

• 摘要5-6
• Abstract6-10
• 英文缩略语表10-11
• 前言11-13
• 第一部分 泡球蚴原头节—人肝癌HepG2细胞共培养体系的建立及其对泡球蚴原头节生长发育的影响13-19
• 材料和方法13-15
• 1.1 实验动物13
• 1.2 细胞系13
• 1.3 试剂及主要仪器设备13-14
• 1.4 人肝癌HepG2细胞的培养14-15
• 1.5 泡状棘球蚴原头节的提取15
• 1.6 体外共培养模型的建立15
• 1.7 统计学分析15
• 结果15-17
• 2.1 形态学观察结果15-16
• 2.2 泡球蚴原头节的活力及其增殖结果16-17
• 讨论17-18
• 结论18-19
• 第二部分 缺氧对泡球蚴原头节VEGF、CD34表达的影响19-30
• 材料和方法19-24
• 1.1 体外培养材料19
• 1.2 药物、试剂及设备19-20
• 1.3 技术路线图20
• 1.4 去铁敏培养基的配制20
• 1.5 泡球蚴原头节的培养及缺氧模型的建立20-21
• 1.6 原头节活力计数21
• 1.7 酶联免疫吸附试验检原理及步骤21-23
• 1.8 结果评判标准23-24
• 1.9 统计学分析24
• 结果24-28
• 2.1 头节形态及活力检测结果24
• 2.2 HIF1-α含量检测结果24-25
• 2.3 VEGF含量检测结果25-27
• 2.4 CD34含量检测结果27-28
• 讨论28-29
• 结论29-30
• 第三部分 VEGF、MVD-CD34在沙鼠肝泡球蚴组织中的表达及意义30-37
• 材料与方法30-33
• 1.1 实验动物及分组30
• 1.2 主要试剂及仪器30-31
• 1.3 原头节混悬液的制备31
• 1.4 沙鼠泡球蚴模型建立31
• 1.5 标本的收集及处理31
• 1.6 石蜡切片的制作31
• 1.7 组织病理学观察31-32
• 1.8 免疫组化Envision法检测MVD-CD34的表达32
• 1.9 免疫组化Envision法检测VEGF的表达32
• 1.10 免疫组化结果评判标准32-33
• 1.11 统计学分析33
• 结果33-35
• 2.1 大体观察33-34
• 2.2 组织病理学观察34
• 2.3 MVD-CD34免疫组化染色结果34-35
• 2.4 VEGF免疫组化染色结果35
• 讨论35-37
• 结论37
• 小结37-38
• 参考文献38-43
• 文献综述43-48
• 参考文献46-48
• 致谢48-49
• 作者简介49-50
• 石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表50

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本文编号：493778