猪白细胞介素2、4分子佐剂对猪口蹄疫疫苗免疫增强作用研究

发布时间：2016-11-30 14:24

  本文关键词：重组白细胞介素-2提高口蹄疫疫苗免疫效果的试验，由笔耕文化传播整理发布。

《四川农业大学》 2006年

猪白细胞介素2、4分子佐剂对猪口蹄疫疫苗免疫增强作用研究

田国宝  

【摘要】：如何增强动物的抗病防御能力和免疫应答水平，最大限度地提高疫苗的免疫效果是当前我国防制口蹄疫生产实践中迫切需要解决的问题。本研究从分子免疫佐剂的角度出发，设计了猪IL-2、4真核表达质粒分别同口蹄疫疫苗联合免疫猪，观察猪白细胞介素2、4分子佐剂对口蹄疫疫苗免疫效果的影响。 采用OIE/FAO口蹄疫世界参考实验室确认的，检测FMDV抗原和血清应优先选用的ELISA法，分别在免疫后0天、15天、30天、60天、90天收集8组共64头猪的血清，，检测口蹄疫特异性抗体，比较各组试验猪的体液免疫应答水平。实验结果表明：脂质体+VR1020-IL-4组(B组)抗体滴度和保护率比其它组高：脂质体+VR1020-IL-2组(A组)、B组、免疫加强组(C组)的抗体水平和保护率接近(P＞0.05)，A组、B组、C组比一次免疫组(D组)、VR1020-IL-2组(E组)、VR1020-IL-4组(F组)、空脂质体组(G组)以及空白对照组(H组)的抗体水平和保护率高(P＜0.05或P＜0.01)；E组、F组比D组、G组、H组抗体水平和保护率高(P＜0.05或P＜0.01)。表明猪IL-2、4分子佐剂能显著提高口蹄疫疫苗的抗体水平及保护率；同时，用脂质体+VR1020-IL-2、4作为口蹄疫疫苗分子佐剂，一次免疫就能达到两次免疫的效果。 采用T淋巴细胞增殖试验、ANAE~+淋巴细胞百分率检测试验以及白细胞计数试验，分别在免疫后0天、15天、30天、60天、90天收集8组共64头猪的血清，检测试验猪的细胞免疫应答水平。实验结果表明：A组T淋巴细胞转化能力、ANAE~+淋巴细胞百分率比其它组高；A组、B组、C组高于D组、E组、F组、G组、H组(P＜0.05或P＜0.01)；E组、F组高于D组、G组、H组(P＜0.05或P＜0.01)；T淋巴细胞转化试验和ANAE~+淋巴细胞百分率检测结果呈相关性。由此表明：猪IL-2、4分子佐剂能提高机体对口蹄疫疫苗的细胞免疫应答。 本研究为采用细胞因子分子佐剂提高猪口蹄疫疫苗免疫效果的进一步研究提供了科学依据。其中：关于猪IL-2、4真核表达质粒作为分子佐剂对仔猪口蹄疫疫苗免疫效果影响的研究国内还未见报道；关于猪IL-2、4真核表达质粒作为分子佐剂对猪口蹄疫疫苗免疫效果的比较研究国内还未见报道。

【关键词】：
【学位授予单位】：四川农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2006
【分类号】：S852.5
【目录】：

中文摘要5-6

Abstract6-8

1.前言8-20

1.1 口蹄疫概况8-11

1.2 口蹄疫的免疫机制11-12

1.3 口蹄疫疫苗佐剂的研究进展12-13

1.4 猪白细胞介素分子佐剂研究进展13-16

1.5 脂质体作为载体和佐剂的研究进展16-18

1.6 猪口蹄疫疫苗免疫存在的问题18-19

1.7 本研究目的意义19-20

2.材料20-21

3.方法21-26

3.1 猪IL-2、4真核表达质粒分子佐剂的制备21-23

3.2 实验动物的分组及免疫23

3.3 猪IL-2、4分子佐剂对猪口蹄疫疫苗体液免疫应答的影响23-24

3.4 猪IL-2、4分子佐剂对猪口蹄疫疫苗细胞免疫应答的影响24-26

3.4.1 猪IL-2、4分子佐剂对T淋巴细胞增殖的影响24-25

3.4.2 猪IL-2、4分子佐剂对ANAE~+淋巴细胞百分率的影响25

3.4.3 猪IL-2、4分子佐剂对白细胞动态变化的影响25-26

4.结果26-39

4.1 猪IL-2、4真核表达质粒分子佐剂的制备结果26

4.2 猪IL-2、4分子佐剂对猪口蹄疫疫苗体液免疫应答影响检测结果26-30

4.3 猪IL-2、4分子佐剂对猪口蹄疫疫苗细胞免疫应答影响检测结果30-39

4.3.1 猪IL-2、4分子佐剂对T淋巴细胞增殖影响试验结果30-33

4.3.2 猪IL-2、4分子佐剂对ANAE~+淋巴细胞百分率影响检测结果33-36

4.3.3 猪IL-2、4分子佐剂对白细胞动态变化影响试验结果36-39

5.讨论39-45

5.1 脂质体包装系统对免疫应答的作用39-40

5.2 口蹄疫特异性抗体的检测40

5.3 T淋巴细胞增殖反应的MTT检测法40-42

5.4 猪IL-2、4分子佐剂对动物疫苗免疫应答的作用42-44

5.5 猪IL-2、4分子佐剂的应用前景44-45

6.结论45-46

参考文献46-52

致谢52-53

附录53-56

在读期间发表的论文56

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