利用CRISPR/Cas9系统制备KRTAP13-1基因敲除绒山羊

发布时间：2023-12-17 13:08

　　内蒙古白绒山羊是产绒量和绒纤维品质都位居世界前列的山羊品种,其绒产量约占中国的一半以上,占世界羊绒产量的1/3。山羊绒作为内蒙古白绒山羊最重要的经济组成部分,是一类稀缺珍贵的动物资源,在国际上享有盛誉。但由于国际羊绒市场需求量大,各产区纷纷以提高产量为目的进行杂交扩繁,导致羊绒品质急速下降,使种质资源被严重破坏。传统生物学育种也面临着优良种系存栏少、繁育周期长等问题,而基因编辑技术的应用为大动物育种提供了新的方向。角蛋白关联蛋白(keratin-associated protein,KAP)是角蛋白的重要组成成分,对毛发等皮肤衍生物的形成和结构有着重要影响。研究发现KAP13-1的调控基因角蛋白关联蛋白基因(keratin-associated protein,KRTAP)13-1参与了毛囊的早期发育,并对绒毛纤维直径产生影响。本实验利用CRISPR/Cas9系统制备KRTAP13-1基因敲除绒山羊,探究KRTAP13-1基因对于毛囊发育和纤维直径的影响,为培育超细绒型绒山羊育种新材料提供理论依据和研究基础。1、载体构建在KRTAP13-1基因的编码序列(Coding sequence...

【文章页数】：63 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
缩略词表
第一章 文献综述 CRISPR/Cas系统简述
    1 CRISPR/Cas系统的研究历程
    2 CRISPR/Cas系统的功能
        2.1 CRISPR/Cas系统的获得性免疫功能
        2.2 CRISPR/Cas系统的基因编辑功能
    3 CRISPR/Cas系统的分类与作用
    4 CRISPR/Cas系统的应用
        4.1 CRISPR/Cas9系统的应用
        4.2 CRISPR/Cas13系统的应用
    5 CRISPR/Cas系统的安全问题
    6 结语
第二章 研究论文
    1 引言
    2 材料与方法
        2.1 材料
        2.2 方法
    3 结果
        3.1 Cas9/gRNA共载体的构建与检测
        3.2 单克隆细胞系的筛选与鉴定
        3.3 KRTAP13-基因敲除绒山羊的制备
    4 讨论
        4.1 gRNA载体的设计与构建
        4.2 单克隆细胞的筛选
        4.3 KRTAP13-1基因敲除绒山羊的制备
结论
参考文献
致谢



本文编号：3873937