马立克病PCR检测方法建立及SD2012-1株分离与毒力试验

发布时间：2024-02-14 02:35

　　马立克病（Marek’s Disease，MD）是由细胞结合性疱疹病毒引起的一种传染性肿瘤病，随着马立克病病毒毒力的不断增强，其对养禽甘造成了一定的威胁。本研究拟通过设计一对敏感性和特异性都较好的检测引物，从而优化马立克病的PCR检测方法，为今后马立克病的防控提供技术支撑。2012年，山东省某养鸡场暴发了严重的马立克病，本实验室从该鸡场分离到一株马立克病病毒，命名为SD2012-1，本研究对该株病毒进行序列测定和分析及毒力试验，明确了此毒株的毒力及序列信息，为掌握我国马立克病病毒株的进化规律提供线索，为今后马立克病的防控提供依据。 本研究根据马立克病病毒的Meq基因序列设计特异性检测引物，与已报道的4对检测引物进行特异性和敏感性的比较研究，结果表明，5对PCR引物均具有较好的特异性，但自行设计的Meq5引物在DNA浓度为3.81×10-3μg/mL时仍能够扩增出目的条带，敏感性明显优于其他4对引物。应用该引物对组织样品进行检测，结果表明，羽髓、心脏、肝脏、脾、肾脏、腺胃及十二指肠中均能检测到马立克病病毒。 从山东省某发病鸡场采集的样品中分离到的MDV SD2012-1毒株，经PCR方法...

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图2-15对引物的特异性检测结果

果异性试验结果5对不同检测引物Meq1、Meq2、Meq3、Meq4及Meq5，分别用其最马立克病病毒（MDV）、白血病病毒(ALV)、网状内皮组织增生病)DNA样品进行PCR扩增，用1%的琼脂糖凝胶电泳。结果显示，M增MDV时能够扩增出一条甘小约为1403bp的....

图2-25对Meq基因引物敏感性检测结果

敏感性试验结果将原来的DNA（浓度38.1μg/mL）进行10倍、100倍、1000倍及10释，稀释后用5对不同的针对Meq基因的引物分别进行PCR扩增。结，Meq1引物在DNA稀释10倍、100倍、1000倍时能够扩增出甘小约3b....

图2-3不同组织中MDV的检测

图2-3不同组织中MDV的检测2000DNAMaker1.羽髓2.心脏3.肝脏4.脾5.肾脏6.腺胃7.十Fig.2-3MDVdetectionindifferenttissue000DNAMaker1.Featherpulp2.....

图3-1PCR鉴定MDV、ALV及REVA:PCR扩增Meq基因;B:PCR扩增vIL-8基因;C:PCR检测ALV;D:PCR检测REVM:DL2000DNAMarker;+:REV（C）或ALV（D）阳性对照;1:血液样品;2:羽髓;3:

图3-1PCR鉴定MDV、ALV及REVA:PCR扩增Meq基因;B:PCR扩增vIL-8基因;C:PCR检测ALV;D:PCR检测REVM:DL2000DNAMarker;+:REV（C）或ALV（D）阳性对照;1:血液样品;....

本文编号：3897604