睾丸注射法制备携带猪PID1基因的转基因兔的研究

发布时间：2024-02-15 04:05

　　随着生活水平的不断提高，人们对猪肉肉质的要求也越来越高，肌内脂肪（IMF）是影响肉质的重要指标之一。肉的嫩度、风味、多汁性都与之相关。从上世纪，人们追求的主要是瘦肉率，随着不断的选种选育，虽然瘦肉率得到了明显提高，但造成现在的肉口感下降，商品瘦肉型猪的肌内脂肪平均含量仅仅在1.5%左右，严重影响了肉的口感。本实验室前期研究发现磷酸酪氨酸互作结构域1（PID1）与肌内脂肪的沉积密切相关，并且在高肌内脂肪的莱芜猪中呈现高表达。其他相关研究也发现，PID1基因与肉质存在一定联系。本研究采用制备转基因兔动物模型的方式，将携带猪PID1基因的重组质粒pIRES2-acGFP-PID1注射到新西兰兔的睾丸内，通过后代检测进一步研究PID1基因与肉质的关系，同时进一步探讨睾丸注射法在转基因动物制备中的可行性。本论文主要获得了如下结果： 一、设计克隆猪PID1基因CDS区全长的特异性引物，经过PCR扩增获得该基因CDS区全长，在特异性引物的5ˊ端分别加入限制性内切酶Bgl II和EcoR I的酶切序列，并加入保护碱基。对pIRES2-acGFP空载体和基因全长分别用上述两对限制性内切酶酶切、回收、纯化...

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1猪肌肉组织总RNA提取结果

图1猪肌肉组织总RNA提取结果ig.1ResultofRNAextractedfrompigmuscularti表9cDNA检测引物able9TheprimersusedforthedetectionofthecD引物序列Prim....

图2GAPDH检测cDNA结果

对猪肌肉组织中总RNA进行提取，OD值测定结果显示用1%的琼脂糖凝胶进行检测，有28S、18S、5S3条清晰GAPDH的序列设计特异性引物（表9）检测cDNA。检图1猪肌肉组织总RNA提取结果Fig.1ResultofRNAextracted....

图3PID1基因全长扩增结果

图3PID1基因全长扩增结果Fig.3ThePCRamplificationoffullcodingregionofthePID1genes的重组质粒及鉴定关鉴定基和酶切位点的目的基因全长经过限制性内切酶BglII和。空质粒pIRES2-ac....

图4菌液PCR检测结果

图3PID1基因全长扩增结果Fig.3ThePCRamplificationoffullcodingregionofthePID1genes建成功的重组质粒及鉴定组质粒相关鉴定有保护碱基和酶切位点的目的基因全长经过限制性内切酶BglII和Eco....

本文编号：3899174