绵羊肺炎支原体LY-1株分离鉴定及HSP70 P30基因克隆和序列分析

发布时间：2024-02-18 08:13

　　羊传染性胸膜肺炎是由支原体引起的羊的一种高度接触性传染病,绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae)是其重要病原之一。本研究从发病羊的肺脏病料中成功分离出1株绵羊肺炎支原体,并对其生物学特性和免疫原性基因等进行了系统研究,得到了以下研究结果:1.2016年11月,河南省卢氏县某规模化湖羊场发生疑似绵羊传染性胸膜肺炎的病例。羔羊和成年羊均可发生,但羔羊症状表现较重。羔羊死亡率约30%,成年羊未见死亡。病羊体温升高、精神沉郁、食欲减退、咳嗽、呼吸困难和突然死亡。剖检发现其以胸、胸膜和肺脏的浆液性和纤维素性炎症为主要病变特征,具体表现为胸腔和心包有淡黄色积液,胸膜变厚而粗糙,上有黄白色纤维素性沉积,部分羊只发生胸膜与肋膜、心包发生粘连;肺表面有出血点,肺小叶间组织变宽,肺脏色泽变暗等典型病变。通过临床症状和病理剖检,初步判定该病为绵羊传染性胸膜肺炎。2.从发病羊的肺脏病料中分离鉴定出1株疑似支原体,命名为LY-1株。该菌培养困难,但在PPLO固体培养基中,经37℃静置培养5⁷日,可长成圆形、透明、露滴状的针尖大小的菌落;培养14¹

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【部分图文】：

图2-1眼观病理变化

急喘、呼吸困难、四肢伸直、倒地不起，发出呻吟哀叫，直至死亡（图2-1A）。剖检死亡羊只，主要以胸、肺脏、肝出现严重的病理变化。胸腔有渗出积液（图2-1B），肺脏表面有渗出液，肺切面呈暗红色，有淤血，心包有黄白色纤维素附着（图2-1C和D），肝脏呈暗红色，上有血班（图2-1E），....

图2-2绵羊肺炎支原体组织培养液（A）和纯化后的培养液（B）

将培养的菌经革兰氏染色镜检（油镜1000×）可看出菌体被染成红色，说明为革兰氏阴性菌，菌落没有固定的形状，杆状、球状均有，这是支原体多型性的特征（图2-2A），同时进行瑞氏染液染色镜检（油镜1000×）（图2-2B），可看出支原体圆形，半透明状的典型形态，证明此分离菌株为支原体菌....

图2-3绵羊肺炎支原体革兰氏染色（A）和瑞氏染色（B）

图2-2绵羊肺炎支原体组织培养液（A）和纯化后的培养液（B）Fig.2-2Mycoplasmaovipneumoniaetissueculturemedium(A)andpurifiedcultureme2.3.3支原体形态观察将培养的菌经革兰氏染色镜....

图2-4支原体检测结果

此次药敏结果可为河南地区绵羊肺炎支原体病的治疗提供参考。2.3.6支原体试剂盒检测用商品化支原体鉴定试剂盒进行套式PCR鉴定结果如下（图2-4），参考说明书中第二轮PCR结果，阳性对照应为590bp，待检测样品应为179bp的片段大小，此分离株PCR结果在100bp至25....

本文编号：3902174