甘肃省乳房炎奶牛乳源肠球菌的分离、药敏试验及毒力基因原核表达载体的构建

发布时间：2024-02-25 21:02

　　为分离临床型奶牛乳房炎中的肠球菌,检测其耐药性和携带毒力基因的情况,本试验采集了甘肃省东、中和西部3个地区41头临床型乳房炎奶牛的奶样93份,并构建了肠球菌毒力基因的原核表达载体。试验使用选择性培养基分离纯化肠球菌,16S rRNA和生化试验结合的方法鉴定所分离菌株的种;选取16种抗菌药进行药敏试验;常规PCR方法检测11种毒力基因的携带情况,最后对具有免疫原性的毒力基因进行原核表达载体的构建。鉴定结果显示,93份乳样中18株为肠球菌,并分为9种。药敏结果显示,分离株多数为多重耐药菌(multiple resistant bacteria,MDR),占88.89%,未发现耐万古霉素菌株(vancomycin-resistant enterococcus,VRE),万古霉素敏感率94.12%,所有分离株至少对一种抗菌药耐药。PCR检测结果表明,11种毒力基因均有检出,cob基因检出率最高(44.44%),efaA、hyl、ccf和esp基因检出率分别为33.33%、27.78%、27.78%和22.22%,Asa1、cylA、EF3314和gelE基因检出率均为16.67%,Ace和cy...

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【部分图文】：

图1不同种类抗生素敏感性

表3菌株分离结果Table3Resultsofstrainisolation菌株种类Strains地区Regions编号Serialnumber天水Tianshui定西Dingxi蒙氏肠球菌E.mundii80TS1～TS8屎肠球菌E.....

图2毒力基因PCR检测结果

表4肠球菌溶血类型和数量Table4Typeandquantityofenterococcalhemolysis菌株种类Strains溶血类型Hemolytictypesαβγ屎肠球菌E.faecium020粪肠球菌E.faecalis....

图3部分肠球菌16SrRNA扩增结果

由图3可知,所有分离株16SrRNA扩增长度在1400～1500bp。由图4可知,构建的进化树分为4个类型,8株蒙氏肠球菌除TS4外其他的在一个大分支上;TS9(屎肠球菌)、TS10(屎肠球菌)、TS11(血栖肠球菌)、TS12(血栖肠球菌)、TS14(小肠肠球菌)、TS....

图4肠球菌16SrRNA系统发育进化树

图3部分肠球菌16SrRNA扩增结果2.6原核表达载体构建

本文编号：3910851