miR-378在牛前体脂肪细胞分化的作用与机制

发布时间：2024-03-13 22:09

　　脂肪组织对动物机体中能量的储存、调节代谢发挥重要作用。脂肪组织在动物机体中的沉积与肉质中含量比例也是遗传育种研究的重要课题。动物脂肪的生成受多种因素调节，基因、酶活性和激素等。随着研究的深入，脂肪细胞的增殖与分化受microRNA(miRNA)不同程度的调节，其通过与脂肪细胞分化相关靶基因mRNA特定位点结合而降解其mRNA或抑制蛋白的合成而发挥调控作用。并且已有研究报道，miR-378对3T3-L1细胞系有促进分化作用，但是其在原代分离培养前体脂肪细胞分化的调控机理尚不清楚。 为探讨miR-378对牛前体脂肪细胞分化过程中的调控作用，我们在牛不同组织中检测miR-378表达规律，发现在前体脂肪细胞中具有一定的表达丰度，同时在心脏、脾脏、小肠中也有较高表达水平。将前体脂肪细胞诱导分化培养，检测到miR-378表达水平在分化形成脂滴后显著上调，揭示了miR-378在牛各组织及前体脂肪细胞分化过程中的表达规律。 研究miR-378在前体脂肪细胞中发挥调控靶基因的作用与功能，结合生物信息学与体外双荧光素酶报告系统发现，miR-378可抑制E2F2、RANBP103’-UTR双荧光素酶重组质粒...

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1.1miRNA的生物合成过程

了Drosha之外还有一种双链RNA结合蛋白Pasha(partnero对Drosha的切割作用有协同作用[9]。转运:细胞核中高浓度的RanGTP促进Exportin5(Exp5)使NA并将其转运至细胞质中。然后Exp5与pre-miRNA....

图1.2茎环引物Real-TimePCR原理

此检测miRNA需要设计特异性颈环引物。miRNApre-转录本等特点增大了反转录引物设计难度。m两种，第一种方法，是通过一段与已知miRNA3’端互补形成茎环结构的通用序列。这种结构阻止了m结合，使得特异性增加。第二种方法，将miRNA后再加上通用序列设计反转录引....

图1.3psiCHECK-2载体结构

预测网站各有优缺点，结果也存在交集，所以如的准确率。但是这些网站只是进行预测工作，后子生物学方法来实现。位点的验证酶报告分析筛预测出靶基因后，便要进行分子生物学验证。mRNA之间的相互结合关系来进行验证。操作原UTR靶位点克隆到荧光素酶报告载体中，重组质转染入细胞系中，检测....

图2.1脂肪细胞的起源与分化

图2.1脂肪细胞的起源与分化Fig.2.1ThegenesisanddifferentiationofadipocytesiRNA调控前体脂肪细胞分化有研究发现，大量参与调控脂肪细胞分化的基因是一些miRNA的靶些miRNA也在某些程度上促进或抑制脂肪细胞....

本文编号：3927639