西藏部分地区牦牛肉孢子虫的形态及其分子特点

发布时间：2024-03-23 20:27

　　肉孢子虫是家畜常见的胞内寄生原虫,其导致的肉孢子虫病常致使宿主生长发育缓慢,严重时引起死亡。我国是牦牛出栏量最大的国家,其主要出产在青藏高原,是当地牧民主要的经济来源。目前,牦牛体内发现的肉孢子虫有2种,牦牛犬肉孢子虫(Sarcocystis poephagicanis Wei,1983)和牦牛肉孢子虫(S.poephagi Wei,1983),但原始描述简单,且没有提供任何分子数据。本实验利用形态学和4种分子标记(18S rDNA、28S rDNA、线粒体COX1基因和ITS1基因)对采自西藏地区(拉萨市、那曲市和日喀则市)的牦牛肉孢子虫的自然感染情况、种类和分子系统学进行了研究。本次共采集了 101头牦牛的肌肉样品,镜检后发现肉孢子虫的自然感染率为63.37%(64/101)。基于形态学和4种分子标记特征,共鉴定出5种肉孢子虫:人肉孢子虫(S.hominis Raillietand Lucet,1891)、哈氏肉孢子虫(S.heydorni Dubey,2015)、毛形肉孢子虫(S.hirsuta Moule,1888)、牦牛犬肉孢子虫(S.poephagicanis)和牦牛未定种...

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【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
    1 肉孢子虫的发现及分类地位
    2 肉孢子虫的生活史
    3 肉孢子虫的致病性
    4 肉孢子虫的分类标准
        4.1 肉孢子虫的包囊形态
        4.2 宿主特异性
        4.3 遗传标记的分子特征
    5 牦牛肉孢子虫的研究背景和意义
        5.1 牦牛肉孢子虫的国内外研究现状
        5.2 研究意义
第二章 牦牛肉孢子虫的形态学和分子系统学研究
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 牦牛肌肉样品采集
        2.2 牦牛肌肉样品鉴定
        2.3 肉孢子虫包囊的分离和光镜观察
        2.4 肉孢子虫包囊的透射电镜观察
        2.5 分子实验试剂及实验仪器
            2.5.1 实验试剂及其配置方法
            2.5.2 实验仪器
        2.6 分子实验方法
            2.6.1 单包囊DNA提取
            2.6.2 目的基因片段PCR扩增
            2.6.3 PCR产物的回收和纯化
            2.6.4 目的片段的连接和转化
            2.6.5 阳性克隆检测
            2.6.6 序列测定
            2.6.7 序列分析
    3 实验结果
        3.1 牦牛肌肉样品Cytb基因鉴定结果
        3.2 自然感染率调查
        3.3 牦牛肉孢子虫包囊形态
            3.3.1 人肉孢子虫(S.hominis)
            3.3.2 哈氏肉孢子虫(S.heydorni)
            3.3.3 毛形肉孢子虫(S. hirsuta)
            3.3.4 牦牛未定种肉孢子虫(Sarcocystis sp.)
            3.3.5 耗牛犬肉孢子虫(S.poephagicanis)
        3.4 牦牛肉孢子虫的基因序列分析
            3.4.1 牦牛肉孢子虫的18S rDNA序列分析
            3.4.2 牦牛肉孢子虫的28S rDNA序列分析
            3.4.3 牦牛肉孢子虫的COX1基因序列分析
            3.4.4 牦牛肉孢子虫的ITS1基因序列分析
        3.5 牦牛肉孢子虫的基因序列的遗传距离分析
        3.6 牦牛肉孢子虫基于4种基因序列的分子系统学分析
            3.6.1 牦牛肉孢子虫基于18S rDNA序列的分子系统学分析
            3.6.2 牦牛肉孢子虫基于28S rDNA序列的分子系统学分析
            3.6.3 牦牛肉孢子虫基于线粒体COX1基因序列的分子系统学分析
            3.6.4 牦牛肉孢子虫基于ITS1基因序列的分子系统学分析
    4 讨论
    5 结论
参考文献
攻读硕士学位期间完成的科研成果
致谢



本文编号：3936421