山羊传染性胸膜肺炎新诊断分子的筛选与评价

发布时间：2024-04-20 03:08

　　山羊传染性胸膜肺炎(Contagious Caprine Pleuropneumonia,CCPP)是由山羊支原体山羊肺炎亚种(Mycoplasma capricolum subsp.capripneumoniae,Mccp)引起的一类严重呼吸道疫病,主要危害山羊和一些野生羊,被世界动物卫生组织(OIE)列为报告动物疫病之一。CCPP流行区域横跨亚洲、中东、非洲40多个国家,主要表现为呼吸系统症状,与小反刍兽疫、巴氏杆菌病以及绵羊肺炎支原体羊肺炎等多种疫病症状相似,且临床表现多样、复杂,需要通过实验室诊断才能确诊。由于Mccp与丝状支原体簇其他成员关系密切,CCPP准确诊断一直是本病防控的关键技术难题之一,特异、敏感的诊断方法是研究工作中最具挑战性的一个方面。挖掘Mccp特异性诊断分子,进而建立准确、有效的诊断方法来研发诊断试剂,是有效防控CCPP的技术支撑条件之一。本研究主要通过两条途径挖掘CCPP新诊断分子。途径一是通过比较基因组学方法,先筛选得到Mccp理论上特异的基因序列,然后,一方面优选潜在的特异性抗原基因序列87.1,利用原核表达技术,获得该基因的重组蛋白,再通过WB、iE...

【文章页数】：74 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图2-1pET-30a-87.1双酶切鉴定Fig.2-1EnzymeidentificationoftherecombinantplasmidpET-30a-87.1

中国农业科学院硕士学位论文第二章山羊支原体山羊肺炎亚种特异性抗原筛选和评价132.2.3重组质粒鉴定构建的重组质粒pET-30a-87.1经BamHⅠ、XhoⅠ双酶切后，出现约5000bp和540bp大小的条带，与预期结果一致，见图2-1，结合测序结果，重组质粒pET-30a-8....

图2-287.1重组蛋白表达形式

中国农业科学院硕士学位论文第二章山羊支原体山羊肺炎亚种特异性抗原筛选和评价132.2.3重组质粒鉴定构建的重组质粒pET-30a-87.1经BamHⅠ、XhoⅠ双酶切后，出现约5000bp和540bp大小的条带，与预期结果一致，见图2-1，结合测序结果，重组质粒pET-30a-8....

图2-387.1重组蛋白与Mccp阴阳性血清WB反应Fig.2-3ResultsofWBfor87.1recombinantproteinreactedwithMccpnegativeandpositiveserum

中国农业科学院硕士学位论文第二章山羊支原体山羊肺炎亚种特异性抗原筛选和评价2.2.5WB评估反应原性以及特异性WB对87.1重组蛋白的反应原性以及特异性进行了初步评估，结果表明：约26kD的地方，Mccp阳....

图2-487.1重组蛋白纯化效果

图2-387.1重组蛋白与Mccp阴阳性血清WB反应Fig.2-3ResultsofWBfor87.1recombinantproteinreactedwithMccpnegativeandpositiveserumM：蛋白分子量标....

本文编号：3958781