PPARγ在鹅卵巢颗粒细胞脂质代谢中的功能研究

发布时间：2024-06-13 09:45

　　鹅产蛋时所处的饲养环境和方式,会在一定程度上影响鹅的产蛋性。同时,卵泡的发育与激素的水平,也能调控鹅的产蛋性。而鹅产蛋的数量被决定的最直接的因素,必然是卵泡的发育。颗粒细胞不断的增殖继而凋亡,卵泡类的固醇激素,其中含量的变化,均伴随着卵泡的发育。脂质代谢的调控因素如下,它由脂肪酸的从头合成,脂肪酸β氧化与甘油三酯进行合成和分解一起构成,其中PPARγ在脂质代谢中发挥重要的作用,在脂肪细胞中高水平表达,具有极强的生脂作用,是调控脂质沉积的重要因子。本试验通过基因克隆获得PPARγ基因CDS区序列和启动子序列,并应用实时荧光定量技术检测不同发育阶段卵泡膜层和颗粒层中PPARγ的表达量,同时在体外培养的鹅颗粒细胞中分别转染PPARγ的过表达载体、PPARγ干扰载体,检测脂质代谢、胆固醇合成等相关途径的关键基因表达量变化,以探究PPARγ在鹅卵巢颗粒细胞脂质代谢中的功能。以下是它得到的大体研究成果。(1)克隆获得鹅PPARγ基因CDS区序列1428bp,启动子序列2795bp。鹅PPARγ基因与其他鸟类相似性为第一高,都处于98%以上,符合物种遗传进化规律;PPARγ启动子具有4个核心启动子区...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1鹅卵巢总RNA提取后琼脂糖凝胶电泳图

鹅卵巢总RNA提取后琼脂糖凝胶rosegelelectrophoresisoftotalRNAS区克隆的引物，对鹅PPARγ基因进行P增条件下，使用扩增产物进行2000bpMarker的参照条带，目因的bp长度。

图2鹅PPARγ基因琼脂糖凝胶电泳图

巢总RNA提取后琼脂糖凝胶电elelectrophoresisoftotalRNAin克隆物，对鹅PPARγ基因进行P件下，使用扩增产物进行100bpMarker的参照条带，目的bp长度。

图4PPARγ在不同卵泡膜层和颗粒层中的相对表达量Fig.4RelativeexpressionlevelsofPPARγmRNAingranulosaandthecaindifferentfollicles

在直径8～10mm的阶段卵泡颗粒层中表达量出现第一次较为显F5阶段卵泡颗粒层上升到最大值，再逐渐下降。如图3所示，其中PPAR卵泡颗粒层表达量显著高于各阶段卵泡颗粒层中的表达量（P＜0.05），PPF2阶段卵泡颗粒层表达量显著高于等级前卵泡（P＜0.05）。PPA....

图5PPARγ在不同培养时间不同颗粒细胞中表达Fig.5RelativeexpressionlevelsofPPARγindifferentgranulosaandtime

图5PPARγ在不同培养时间不同颗粒细胞中表达Fig.5RelativeexpressionlevelsofPPARγindifferentgranulosaandtimePPARγ干扰载体转染鹅颗粒细胞.1转染效果鉴定如图6所示，将构建的PPA....

本文编号：3993446