小鼠巨噬细胞胞外陷阱形成及对贾第虫杀伤作用研究
发布时间：2024-12-21 04:20
十二指肠贾第虫(Giardia duodenalis)又名蓝氏贾第虫(G.lamblia)(简称贾第虫),是一种重要的人兽共患原虫,寄生在宿主十二指肠,主要引起腹泻。贾第虫可通过水源传播,我国城市供水水质和生活饮用水卫生标准均把贾第虫检测列为必检项目。目前治疗贾第虫病常用药物有甲硝唑、替硝唑等,药物副作用较大且虫体已产生耐药性。由于尚没有预防贾第虫病的疫苗,因此贾第虫病仍然是严重危害人畜健康的一种原虫病。天然免疫是机体抵抗病原的第一道防线,目前宿主天然免疫在抗贾第虫感染中的作用尚不明确,深入开展宿主天然免疫防御贾第虫研究将为该病防治提供理论依据。胞外陷阱(Extracellular Traps,ETs)是机体抵抗病原的一种重要天然免疫方式。当嗜中性粒细胞、巨噬细胞等受到外界病原或某些化学物质刺激后,向细胞外释放出主要以DNA为骨架并附着有颗粒蛋白的纤维网状结构,该结构可对多种胞外病原微生物进行捕获和杀灭。贾第虫是一种胞外寄生原虫,目前贾第虫能否诱导巨噬细胞ETs(METs)以及该METs对贾第虫是否具有捕获和杀伤作用尚不清楚。本研究对贾第虫诱导巨噬细胞ETs形成及METs对贾第虫的杀伤作...
【文章页数】：81 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
abstract
英文缩写词表
前言
第一篇 文献综述
第1章 贾第虫研究进展
1 贾第虫病原学与生活史
2 贾第虫的分类
3 贾第虫的致病性
4 贾第虫病与免疫
5 贾第虫病的诊断和治疗
6 结语
第2章 胞外陷阱研究进展
1 胞外陷阱的作用及性质
2 胞外陷阱形成的分子机制
3 胞外陷阱与病原
4 巨噬细胞胞外陷阱研究进展
5 胞外陷阱与自身免疫疾病
6 结语
第二篇 研究内容
第1章 贾第虫诱导METs形成及成份鉴定
1 材料
1.1 主要试剂
1.2 主要设备
1.3 贾第虫虫株及细胞
1.4 主要试剂配方
2 方法
2.1 小鼠腹腔巨噬细胞的制备与培养
2.2 小鼠腹腔巨噬细胞纯度及ETs释放能力的鉴定
2.3 贾第虫滋养体的培养和收集
2.4 扫描电镜观察贾第虫诱导的METs超微结构
2.5 间接免疫荧光检测贾第虫诱导的METs成份
3 结果
3.1 小鼠腹腔巨噬细胞分离与鉴定
3.2 小鼠腹腔巨噬细胞ETs释放能力的鉴定
3.3 贾第虫滋养体的体外纯培养
3.4 贾第虫可诱导巨噬细胞产生ETs结构
3.5 贾第虫诱导的METs成份鉴定
4 讨论
5 小结
第2章 贾第虫诱导的METs释放的相关分子作用研究
1 材料
1.1 主要试剂
1.2 主要设备
2 方法
2.1 METs释放的动力学研究
2.2 MAPK通路、MPO、Ca2+(SOCE)、NADPH oxidase在贾第虫诱导METs释放中的作用
2.3 胞内活性氧簇产生量和胞外乳酸脱氢酶释放量的检测
2.4 数据分析
3 结果
3.1 贾第虫诱导METs释放呈剂量和时间依赖性
3.2 MAPK通路蛋白对METs释放的影响
3.3 MPO、Ca2+ (SOCE)、NADPH oxidase对 METs释放的影响
3.4 胞内活性氧簇及胞外乳酸脱氢酶检测
4 讨论
5 小结
第3章 METs对贾第虫滋养体的杀伤作用
1 材料
1.1 主要试剂
1.2 主要设备
2 方法
2.1 细胞松弛素D对 METs释放的影响
2.2 METs作用对贾第虫滋养体存活率的影响
2.3 METs作用后贾第虫滋养体形态变化观察
2.4 数据分析
3 结果
3.1 细胞松弛素D对 METs的释放影响
3.2 METs作用对贾第虫滋养体的影响
4 讨论
5 小结
结论
参考文献
导师简介
作者简介及科研成果
致谢
本文编号：4018389
【文章页数】：81 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
abstract
英文缩写词表
前言
第一篇 文献综述
第1章 贾第虫研究进展
1 贾第虫病原学与生活史
2 贾第虫的分类
3 贾第虫的致病性
4 贾第虫病与免疫
5 贾第虫病的诊断和治疗
6 结语
第2章 胞外陷阱研究进展
1 胞外陷阱的作用及性质
2 胞外陷阱形成的分子机制
3 胞外陷阱与病原
4 巨噬细胞胞外陷阱研究进展
5 胞外陷阱与自身免疫疾病
6 结语
第二篇 研究内容
第1章 贾第虫诱导METs形成及成份鉴定
1 材料
1.1 主要试剂
1.2 主要设备
1.3 贾第虫虫株及细胞
1.4 主要试剂配方
2 方法
2.1 小鼠腹腔巨噬细胞的制备与培养
2.2 小鼠腹腔巨噬细胞纯度及ETs释放能力的鉴定
2.3 贾第虫滋养体的培养和收集
2.4 扫描电镜观察贾第虫诱导的METs超微结构
2.5 间接免疫荧光检测贾第虫诱导的METs成份
3 结果
3.1 小鼠腹腔巨噬细胞分离与鉴定
3.2 小鼠腹腔巨噬细胞ETs释放能力的鉴定
3.3 贾第虫滋养体的体外纯培养
3.4 贾第虫可诱导巨噬细胞产生ETs结构
3.5 贾第虫诱导的METs成份鉴定
4 讨论
5 小结
第2章 贾第虫诱导的METs释放的相关分子作用研究
1 材料
1.1 主要试剂
1.2 主要设备
2 方法
2.1 METs释放的动力学研究
2.2 MAPK通路、MPO、Ca2+(SOCE)、NADPH oxidase在贾第虫诱导METs释放中的作用
2.3 胞内活性氧簇产生量和胞外乳酸脱氢酶释放量的检测
2.4 数据分析
3 结果
3.1 贾第虫诱导METs释放呈剂量和时间依赖性
3.2 MAPK通路蛋白对METs释放的影响
3.3 MPO、Ca2+ (SOCE)、NADPH oxidase对 METs释放的影响
3.4 胞内活性氧簇及胞外乳酸脱氢酶检测
4 讨论
5 小结
第3章 METs对贾第虫滋养体的杀伤作用
1 材料
1.1 主要试剂
1.2 主要设备
2 方法
2.1 细胞松弛素D对 METs释放的影响
2.2 METs作用对贾第虫滋养体存活率的影响
2.3 METs作用后贾第虫滋养体形态变化观察
2.4 数据分析
3 结果
3.1 细胞松弛素D对 METs的释放影响
3.2 METs作用对贾第虫滋养体的影响
4 讨论
5 小结
结论
参考文献
导师简介
作者简介及科研成果
致谢
本文编号：4018389
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