水牛脂肪干细胞生物学特性及表观遗传修饰检测的初步研究

发布时间：2025-01-18 14:02

　　本研究从水牛腹股沟处脂肪组织中,通过胶原酶消化法分离出水牛脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ASCs),观察原代及传代后细胞形态。将分离得到的细胞用低糖-DMEM(Dulbecco,s modified Eagle，s medium low glucose,LG-DMEM)和 α-MEM(α modified Eagle's medium)培养和传代,进行生长曲线的评定,建立一种适合水牛ASCs分离和培养的方法。利用反转录聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)的方法检测水牛ASCs多能性相关基因表达情况,选择适当抗体,利用流式细胞技术,检测水牛ASCs多种表面抗原的表达情况,将水牛ASCs体外诱导分化(成脂、成骨、成软骨)后进行相关检测,初步探索水牛ASCs的诱导分化能力。利用实时荧光定量PCR(quantitive real time PCR,qRT-PCR)的方法检测水牛ASCs表观遗传修饰情况,探索水牛ASCs作为供体细胞并提高核移植效率的可行性。研究取得如下结果...

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图２－１水牛ＡＳＣｓ形态学观察结果??

胞核较暗；接种３ｈ后ＡＳＣｓ开始贴壁，２４ｈ后首次换液时观察发现细胞呈梭型或成??纤维状，４８ｈ后开始伸展并呈现多角形，胞核位于细胞中央，胞浆对比明显；７－８ｄ时细??胞呈成纤维细胞样生长，细胞集落呈现旋涡状；每代细胞之间没有明显的形态学差异。??ｖ??ｆｔ??原代?２４ｈ?（４....

图2-2水牛ASCs生长曲线

广西大学领士学位论文水牛脂肪干细胞生物学特性及表观遗传修饰检测的初步研究??３．２生长曲线的测定??选取生长状况良好的Ｐ３代（３）、Ｐ５代（３）、Ｐ６代（￥）水牛ＡＳＣｓ进行生长曲??线测定。由生长曲线得知，细胞接种于２４孔板后，经过ｌ－２ｄ的调整期后细胞进入对数??生长期，第六....

图２４水牛ＡＳＣ核型分析??Ｆｉｇ．２－４?Ｋａｒｙｏｔｙｐｅ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ｂｕｆｆａｌｏ?ＡＳＣ??

Ｍ：?ＭａｒｃＭ?Ｍ?０?Ｓ?Ｎ?Ｋ?ＣＭ?〇＝?〇〇ｔＷ＾?：：?Ｓ：?Ｓｏｘ２ＬＭ?■?Ｉ?Ｎ＝?Ｎａｎ电！：＇．．?Ｋ：?Ｋｌｆｊ聲‘?Ｉ?ｃＭ：?ｃ－图２－３水牛ＡＳＣｓ多能性相关基因?Ｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｃｙ?ｒｅｌａｔｅｄ?ｇｅｎｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ｂ０代....

图２－３水牛ＡＳＣｓ多能性相关基因表达??Ｆｉｇ２－３?Ｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｃｙ?ｒｅｌａｔｅｄ?ｇｅｎｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ｂｕｆｆａｌｏ?ＡＳＣｓ??

由此结果可见，水牛ＡＳＣｓ经体外长期培养后仍可以保持较高的正常核型比率。??雜??图２４水牛ＡＳＣ核型分析??Ｆｉｇ．２－４?Ｋａｒｙｏｔｙｐｅ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ｂｕｆｆａｌｏ?ＡＳＣ??４分析与讨论??ＢＭＳＣｓ是一种存在于骨髓组织中的成体干细胞，具有多向分化潜能，体外....

本文编号：4028706