Gas在绵羊耳部不同毛色皮肤中的表达与定位

发布时间：2017-06-12 18:10

  本文关键词：Gas在绵羊耳部不同毛色皮肤中的表达与定位，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：黑色素皮质素受体1(Melanocortin Receptor 1,MCIR)是参与不同种属哺乳动物毛色调控的最主要基因之一[1],其存在于黑素细胞表面,调控黑色素的合成。MC1R作为G蛋白偶联受体主要通过异源三聚体G蛋白的激活完成。Gas作为异源三聚体G蛋白的下游亚基基因在不同毛色绵羊背部皮肤中表达不同,它通过黑皮质素信号通路调节单个黑色素细胞生成色素类型,因此,Gas基因可能在毛色形成中具有重要作用。本试验通过设计引物扩增绵羊Gas目的基因序列,从基因水平和蛋白水平进行定量分析,并对其在不同毛色皮肤组织中进行定位分析,以研究其表达的差异,从而为进一步研究该基因调控绵羊毛色的形成机制提供基本的理论依据。试验结果如下：1.依据(NCBI) GeneBank中所公布的绵羊Gαs序列,以该序列的保守区为基础,按照引物设计原则设计引物并合成,通过反转录PCR(RT-PCR)技术成功扩增出Gas目的基因的部分序列,测序所得长度为139bp。通过荧光定量PCR (QRT-PCR)技术研究Gαs目的基因在绵羊耳部不同毛色皮肤组织中mRNA的相对表达量,以探寻其与毛色之间的关系。结果显示：绵羊耳部黑色皮肤中Gas mRNA的相对表达量为：2.7185±0.3565：绵羊耳部白色皮肤中Gas mRNA的相对表达量为：1.2542±0.1132,黑色皮肤表达量显著高于白色皮肤表达量(P0.05)。表明该基因与毛色有一定的相关性。2.通过免疫组织化学法对Gas在绵羊耳部皮肤组织中的表达进行定位研究,结果显示Gαs在绵羊耳部毛发的毛乳头和外根鞘部呈阳性表达。3.应用免疫印迹法(Western blot)对Gas蛋白在绵羊耳部不同毛色皮肤组织中的表达量进行研究,结果显示：Gas蛋白在绵羊耳部黑色和白色皮肤中均有表达,并且在黑色皮肤中的表达量显著高于白色皮肤。综上研究得出：Gas在绵羊耳部黑色皮肤和白色皮肤中均有表达且存在差异性,初步判断Gas参与绵羊耳部毛色的调控过程。
【关键词】：绵羊耳部皮肤 黑色素 G蛋白偶联受体 Gαs基因
【学位授予单位】：山西农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S826
【目录】：

• 摘要7-8
• 引言8-9
• 第一部分 文献综述9-19
• 1 黑色素细胞与黑色素的形成9-11
• 1.1 黑色素细胞的起源9-10
• 1.2 黑色素的形成10-11
• 2 影响动物毛色形成的基因11-15
• 2.1 MC1R基因及其与G蛋白的联系11-13
• 2.2 其他基因对动物毛色的影响13-15
• 3 G蛋白信号通路研究进展15-18
• 3.1 G蛋白偶联受体16
• 3.2 G蛋白及其对毛色生成的作用16-18
• 4 本试验研究的目的18-19
• 第二部分 试验部分19-37
• 试验一 Gαs基因部分cDNA序列的克隆及分析19-24
• 1 材料与方法19-22
• 1.1 试验动物及取材19
• 1.2 主要试剂和仪器19
• 1.3 试验方法19-22
• 2 结果与分析22-23
• 2.1 RT-PCR扩增产物电泳结果22
• 2.2 RT-PCR扩增产物测序结果22-23
• 3 讨论23
• 4 小结23-24
• 试验二 Gαs在不同毛色皮肤中的基因表达差异24-29
• 1 材料与方法24-26
• 1.1 试验动物及取材24
• 1.2 主要试剂和仪器24
• 1.3 试验方法24-25
• 1.4 QRT-PCR数据分析方法25-26
• 2 结果与分析26-27
• 3 讨论27-28
• 4 小结28-29
• 试验三 Gαs蛋白在耳部不同毛色皮肤中的定位29-33
• 1 材料与方法29-31
• 1.1 试验动物及取材29
• 1.2 试验主要仪器29
• 1.3 主要试剂与配制29
• 1.4 试验方法29-31
• 2 结果与分析31-32
• 3 讨论32
• 4 小结32-33
• 试验四 Gαs蛋白在耳部不同毛色皮肤中的定量分析33-37
• 1 材料与方法33-35
• 1.1 试验动物及取材33
• 1.2 主要仪器33
• 1.3 主要试剂与配制33
• 1.4 试验方法33-35
• 2 结果与分析35-36
• 3 讨论36
• 4 小结36-37
• 全文总结37-38
• 参考文献38-49
• ABSTRACT49-51
• 致谢51

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 吴永宏,曹显祖,宋平;水稻敏感性、矮生性调控机理研究连报(Ⅱ)──GAs、IAA水平及其受体水平对水稻敏感性、矮生性的调节[J];安徽农业科学;1996年03期

中国重要会议论文全文数据库 前4条

1 宋平;曹显祖;梁建生;吴永宏;;水稻幼芽膜上GAs专一结合位点研究初报[A];第一届全国青年作物栽培作物生理学术会文集[C];1993年

2 王少根;徐慧芹;陈侠英;;党参对严重烫伤豚鼠血GAS、MTL、β-EP的影响[A];2004年全国危重病急救医学学术会议论文集[C];2004年

3 许钫钫;胡俊清;板东义雄;冯景伟;;GaS亚微米管的几何构造和结构应变[A];2006年全国电子显微学会议论文集[C];2006年

4 鲁明良;姜朝晖;洪宇;方旭东;;人胃癌不同区域组织GAS、GLU、INS表达与手术前后血清中含量变化研究[A];2004年浙江省外科学学术年会论文汇编[C];2004年

中国重要报纸全文数据库 前2条

1 郑金益;国际品牌GAS闪耀石狮时装周[N];中国服饰报;2013年

2 实习记者 李文洁;U—GAS技术为云南褐煤开发辟新径[N];中国化工报;2010年

中国硕士学位论文全文数据库 前4条

1 王准;Gas在绵羊耳部不同毛色皮肤中的表达与定位[D];山西农业大学;2016年

2 王灿;假性甲状旁腺功能减退家系致病位点筛查及GNAS基因c.952 T>C对Gas功能的影响[D];青岛大学;2011年

3 肖硕实;隔药饼灸对功能性消化不良大鼠MTL、GAS、VIP的影响[D];湖南中医药大学;2013年

4 李海龙;GAS对PQ和MB诱导小鼠黑质多巴胺能神经元损伤的保护作用及机制研究[D];第四军医大学;2007年

  本文关键词：Gas在绵羊耳部不同毛色皮肤中的表达与定位，由笔耕文化传播整理发布。

，

本文编号：444638