产γ-氨基丁酸屎肠球菌的筛选及γ-氨基丁酸的定量

发布时间：2017-06-24 02:02

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【摘要】：本试验旨在利用分子生物学方法鉴定分离得到1株产γ-氨基丁酸(GABA)屎肠球菌,并定量测定所产GABA的量。从泡菜、酸奶、土壤、新鲜牛奶样品中筛选出一目标菌株F6,进行形态学特征与革兰氏染色鉴定;再扩增菌株F6的16S r DNA基因,然后测定该基因序列和构建系统发育树;同时采用高效液相色谱(HPLC)法定量测定菌株F6发酵液中的GABA含量。结果表明:菌株F6菌落大而光滑、圆形、直径1~2 mm、边缘整齐、乳白色;在分离培养基上菌落周围形成透明圈,使分离培养基呈黄色;在MRS固体培养基上菌落不透明,周围有透明圈。革兰氏染色鉴定菌株F6为阳性菌。分子生物学鉴定分析显示,菌株F6的16S r DNA基因序列与Gen Bank数据库中屎肠球菌(Enterococcus faecium)的相似性大于99%。HPLC法测定得到GABA标准曲线线性方程为Y=7 080 733.139 5 X-4 511.692 7(R2=0.999 4),通过方程得出菌株F6发酵液中的GABA含量为7.1 g/L,保留时间为7~10 min。结果提示,本试验筛选得到1株高产GABA的屎肠球菌F6。
【作者单位】： 安徽农业大学动物科技学院;江苏优仕生物科技发展有限公司;安徽科技学院动物科学学院;扬州大学动物科学与技术学院;
【关键词】： 屎肠球菌 γ-氨基丁酸 S r DNA基因序列 高效液相色谱法定量 筛选
【基金】：安徽高校自然科学研究项目计划(KJ2015A247) 宿迁市农业科技支撑项目(L201405) 宿迁市产业发展引导资金项目(M201512)
【分类号】：S816.7
【正文快照】： 乳酸菌具有调节机体胃肠道微生态平衡、有益于畜禽健康、改善畜禽生产性能、减少环境污染、替代饲用抗生素等重要作用,在动物生产中的应用日益广泛。然而,乳酸杆菌为厌氧菌,抗逆性差、不耐氧、易失活,应用效果不稳定,而球菌较杆菌具有更强的抗逆性,菌株活性损失较低,未来球菌

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本文编号：476809