咳喘宁对哮喘大鼠肺组织趋化素样因子1表达的影响

发布时间：2017-10-11 16:11

  本文关键词：咳喘宁对哮喘大鼠肺组织趋化素样因子1表达的影响

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【摘要】：目的：通过建立SD (Sprague-Dawley)大鼠哮喘模型,采用免疫组化法和RT-PCR的方法,检测哮喘大鼠肺组织中趋化素样因子1(CKLF1)的表达水平,探讨CKLF1在哮喘发病中的表达变化以及咳喘宁对其的影响。 方法：50只清洁级健康雄性SD大鼠,根据随机分配原则,将其按体重编号,采用随机数字表法分为正常组(A组)和造模组；造模组以卵白蛋白(OVA)为过敏原、氢氧化铝为佐剂致敏SD大鼠,并连续2周予OVA雾化吸入激发制备哮喘大鼠模型。大鼠造模成功后,分为模型组(B组)、布地奈德组(C组)和咳喘宁组(D组)。模型组予生理盐水雾化吸入,各治疗组分别给予相应药物雾化吸入,连续用药7天,观察整个实验过程中各组动物的一般情况。末次用药24小时内处死大鼠,采集标本,左肺行支气管肺泡灌洗后细胞计数、分类计数；右肺组织用于观察肺组织病理变化；同时行免疫组化观察肺组织CKLF1蛋白表达,RT-PCR法检测肺组织中CKLF1的基因表达。 结果： 1.大鼠激发的表现：大鼠激发后表现为易激惹、烦躁、不断搔抓颜面部皮毛等过敏症状,呼吸加快加深,喘息,口鼻轻度发绀,腹部抽动,激发期间活动明显减少、俯伏不动,反复激发后大鼠精神差,反应不灵敏,毛色偏黄无光泽。 2.各组大鼠支气管肺泡灌洗液的细胞计数及分类计数：模型组BALF中白细胞总数、中性粒细胞数、淋巴细胞数及EOS均升高(P0.05)；咳喘宁组与模型组比较, BALF中白细胞总数、淋巴细胞数、EOS均降低(P0.05)；咳喘宁组与布地奈德组比较,BALF中各细胞数无明显差异(P0.05)。 3.各组大鼠肺组织病理变化：正常组无明显炎症改变。模型组呈显著炎性变化。布地奈德组与咳喘宁组均呈轻度炎症变化。 4.各组大鼠肺组织CKLF1免疫组化表达：CKLF1在正常组大鼠肺组织呈弱阳性表达；模型组大鼠肺组织内CKLF1的表达明显较正常组增加；布地奈德组和咳喘宁组CKLF1表达明显强于正常组，，弱于模型组；布地奈德组与咳喘宁组比较CKLF1表达无明显差异。 5.各组大鼠肺组织CKLF1mRNA表达：模型组大鼠肺组织中CKLF1mRNA表达水平明显升高,与正常组比较差异显著(P0.05)。布地奈德组和咳喘宁组CKLF1mRNA表达水平明显弱于模型组(P0.05),咳喘宁组CKLF1mRNA表达水平与布地奈德组相近,无显著差异(P0.05)。 结论： 咳喘宁能减轻哮喘大鼠肺组织的炎性反应；模型组大鼠肺组织中CKLF1的表达水平明显升高,咳喘宁治疗能降低CKLF1的表达。
【关键词】：咳喘宁 CKLF1 哮喘大鼠 免疫组化 RT-PCR
【学位授予单位】：湖南中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R272;R285.5
【目录】：

• 中文摘要6-8
• Abstract8-11
• 英汉~.略词对照表11-12
• 引言12-15
• 第一部分 实验材料与方法15-25
• 1. 实验材料15-18
• 1.1 实验动物15
• 1.2 实验环境15
• 1.3 实验饲料15
• 1.4 实验药物15-16
• 1.4.1 造模药物15
• 1.4.2 受试药物15-16
• 1.5 试剂16
• 1.6 主要仪器及设备16-17
• 1.7 溶液配制17-18
• 1.8 引物设计与合成18
• 2. 实验方法18-25
• 2.1 实验动物分组18
• 2.2 实验动物造模方法18-19
• 2.3 治疗方法19
• 2.4 观察指标及检测方法19-24
• 2.4.1 支气管肺泡灌洗液19-20
• 2.4.2 肺组织病理学观察20-21
• 2.4.3 免疫组织化学法检测各组大鼠肺组织中CKLF1的表达21
• 2.4.4 RT-PCR法检测各组大鼠肺组织CKLF1mRNA表达21-24
• 2.5 统计方法24-25
• 第二部分 实验结果25-28
• 1. 大鼠激发的表现25
• 2. 支气管肺泡灌洗液细胞计数和分类计数25
• 3. HE染色观察各组大鼠肺组织病理形态学特点25-26
• 4. 各组大鼠肺组织CKLF1免疫组化26
• 5. 各组大鼠肺组织中CKLF1mRNA的表达变化26-28
• 第三部分 讨论28-38
• 1. 实验动物的选择28-29
• 2. 动物模型的评价方法29
• 3. 实验指标的选择：趋化素样因子1(CKLF1)与哮喘29-31
• 4. 阳性对照药物的选择31-32
• 5. 咳喘宁的立法依据、组方分析及现代药理学研究分析32-36
• 5.1 立法依据32-33
• 5.2 组方分析33-34
• 5.3 现代药理学研究分析34-36
• 6. 本实验有关问题的探讨36-38
• 结论38-39
• 致谢39-40
• 参考文献40-45
• 附录45-63
• 附录一 综述45-60
• 参考文献56-60
• 附录二 附图60-63
• 附录三 研究生期间发表的论文63

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

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本文编号：1013483