炎症调控PCSK9介导的阿霉素肾病小鼠肾脏脂质沉积的实验研究

发布时间：2017-10-13 12:43

  本文关键词：炎症调控PCSK9介导的阿霉素肾病小鼠肾脏脂质沉积的实验研究

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【摘要】：第一部分：小鼠阿霉素肾病模型和慢性炎症模型的建立 目的：复制小鼠阿霉素肾病模型和慢性炎症模型，为后续实验奠定研究基础。 方法：根据统计学随机数字表，将6周龄雄性BALB/c小鼠随机分为对照组（CTL）、单纯肾病组（ADR）、单纯炎症组（IFM）和炎症肾病组（AWI）。给予ADR组和AWI组尾静脉注射阿霉素10.5mg/kg，建立阿霉素肾病模型；CTL组给予等量的注射用生理盐水；IFM组和AWI组隔日皮下注射0.5ml10%酪蛋白，建立慢性炎症模型。各实验小组分别于实验开始后第4、8、12周末处死小鼠、获取标本，每组每个时间点8个样本。考马斯亮蓝法检测小鼠24h尿蛋白水平；全自动生化分析仪检测血清白蛋白、总胆固醇、低密度脂蛋白、肌酐水平；通过HE染色和PAS染色在光镜下观察肾脏形态学改变； 结果：单纯肾病组和炎症肾病组在注射阿霉素后第2周出现大量蛋白尿，，第8周达到高峰，持续至第12周（P0.05）；炎症组在第6周出现蛋白尿，但水平明显低于炎症肾病组（P0.05）。单纯肾病组和 炎症肾病组第4周出现血白蛋白降低（P0.05）；两组分别在第8、4 周出现血脂增高，第12、8周出现血肌酐增高，差异有统计学意义（P0.05）。单纯炎症组肾脏第4、8、12周光镜下均可见炎症细胞浸 润，不伴其他病理改变；单纯肾病组和炎症肾病组肾脏早期病理类型为微小病变型，两者分别在第12、8周出现局灶节段性肾小球硬化，伴肾功能不全。 结论：阿霉素肾病小鼠模型和慢性炎症模型复制成功。阿霉素小鼠肾病模型早期病理改变为微小病变，随着病程迁延，出现局灶节段性肾小球硬化，伴肾功能不全。炎症能够加重肾病的发展。 第二部分：PCSK9在炎症介导的阿霉素肾病小鼠肾脏脂质沉积的作用研究 目的：探讨炎症在PCSK9介导的阿霉素肾病小鼠肾脏内脂质沉积的可能作用机制。 方法：采用油红O法检测肾脏脂质沉积程度；酶比色法检测肾脏总胆固醇的含量；real-time PCR技术检测肾组织IL-1β、TGF-β1、HNF-1α、SREBP-2、PCSK9、LDLr mRNA表达；免疫组化技术检测肾组织IL-1β、TGF-β1、HNF-1α、SREBP-2、PCSK9、LDLr的蛋白表达。 结果：单纯炎症组、单纯肾病组、炎症肾病组的肾组织总胆固醇含量第4周开始呈进行性升高，均高于对照组（P＜0.05）；单纯炎症组、单纯肾病组总胆固醇第8周开始均低于炎症肾病组（P＜0.05）。单纯炎症组、单纯肾病组和炎症肾病组肾组织IL-1β、TGF-β1、SREBP-2、LDLr mRNA表达量第4、8、12周均高于正常组（P＜0.05），HNF-1ɑ、PCSK9表达量低于正常组（P＜0.05）。单纯炎症组、单纯肾病组肾组织IL-1β、TGF-β1、SREBP-2、LDLr的蛋白表达量第8、12周低于炎症肾病组（P＜0.05），HNF-1α、PCSK9表达量高于炎症肾病组（P＜0.05）。 结论：小鼠阿霉素肾病肾脏炎症程度随时间延长逐步加重。阿霉素肾病模型中胆固醇含量随炎症程度的加重逐渐升高，不伴高脂血症和肾脏病变的单纯炎症反应能引起肾脏少量脂质沉积。随着炎症的逐步加重，SREBP2表达逐步增加，HNF-1α和PCSK9表达逐渐下降，LDLr表达增加，炎症可能通过下调HNF1α-PSCK9-LDLr途径加重肾脏脂质沉积。
【关键词】：阿霉素 酪蛋白 肾病 慢性炎症 炎症 HNF-1ɑ PCSK9 脂质
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R726.9
【目录】：

• 英汉缩略词名词对照5-7
• 摘要7-10
• ABSTRACT10-13
• 第一部分：小鼠阿霉素肾病模型和慢性炎症模型的建立13-28
• 前言13-14
• 1. 材料和方法14-19
• 2. 结果19-24
• 3. 讨论24-25
• 4. 小结25-26
• 参考文献26-28
• 第二部分：PCSK9 在炎症介导的阿霉素肾病小鼠肾脏脂质沉积的作用研究28-53
• 前言28-29
• 1. 材料和方法29-37
• 2. 结果37-47
• 3. 讨论47-49
• 4. 小结49-50
• 参考文献50-53
• 全文小结53-54
• 附图54-65
• 文献综述65-70
• 参考文献68-70
• 致谢70-71
• 攻读硕士学位期间发表文章目录71-72

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前8条

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本文编号：1024920