miRNA-221对支气管哮喘气道炎症的影响及肥大细胞分泌的调控
本文关键词：miRNA-221对支气管哮喘气道炎症的影响及肥大细胞分泌的调控
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【摘要】：目的探讨microRNA-221在哮喘气道炎症中的表达及作用。方法选取4名符合GINA诊断标准的哮喘患儿和4名正常儿童,留取外周血检测miRNA-221表达水平。32只周龄4-5周的健康雄性BALB/c小鼠,适应性喂养1周后,随机分为4组,即正常对照组、OVA组、OVA+Anti-miR221、OVA+control Anti-miR。用卵清白蛋白腹腔注射致敏大鼠,两周后用卵清白蛋白雾化吸入激发。对照组以生理盐水代替卵清白蛋白腹腔注射。模型建立后,进行肺泡灌洗,分离肺组织。应用Real time Quantitative PCR法检测miR221在各组肺组织内的表达。BALF进行总细胞和嗜酸性粒细胞计数。HE染色观察肺部炎症细胞浸润情况。结果1、哮喘患儿和正常患儿外周血miR221表达水平:哮喘患儿外周血miR221表达量明显高于正常儿童(P0.05)。2、哮喘模型组与正常组肺组织miR221表达水平:哮喘模型组小鼠肺组织miR221表达明显高于正常对照组。3、BALF细胞计数:OVA哮喘模型组较正常对照组BALF细胞总数、嗜酸性粒细胞数明显升高;OVA+Anti-miR221组与OVA组相比,细胞总数、嗜酸性粒细胞数降低,但仍高于正常对照组;OVA+control Anti-miR组与OVA组相当。4、肺组织病理:OVA哮喘模型组较正常对照组炎症细胞浸润明显;OVA+Anti-mi R221组与OVA组相比,炎症细胞浸润有减轻;OVA+control Anti-miR组与OVA组相当。结论在哮喘患儿和OVA诱导的哮喘模型中,miR221表达水平升高。表达沉默miR221可减轻哮喘模型气道炎症。提示miR221可能参与了哮喘的发病过程。目的探讨mi RNA-221对肥大细胞功能的影响及机制方法将培养的肥大细胞分为3组,即对照组、mi RNA221高表达组、mi RNA221表达沉默组,收集了LPS刺激后6、12、18小时的肥大细胞培养上清,应用ELISA法检测上清IL-4浓度。应用基因芯片的方法检测肥大细胞中表达活性升高的信号通路相关分子。结果在18小时的样本中,mi RNA221高表达组(转染mi RNA221mimic)IL-4水平高于对照组,差异有统计学意义,P㩳0.05;而mi RNA221表达沉默组(转染mi RNA221inhibitor)的IL-4水平与对照组相比无明显差异。肥大细胞中表达活性升高的信号通路,与阳性对照组相比,mi RNA221高表达组PLC、PI3K/AKT、Ras/ERK三条信号通路相关分子表达量升高。结论mi R221可以刺激肥大细胞分泌IL-4增多,并且能够使得PLC、PI3K/AKT、Ras/ERK三条信号通路活性升高。
【学位授予单位】：南京医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R725.6
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，本文编号：1141214
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