IFN-γ在断乳期小鼠RSV再次感染后气道炎症和气道高反应性中作用及其机制研究

发布时间：2017-12-24 09:15

  本文关键词：IFN-γ在断乳期小鼠RSV再次感染后气道炎症和气道高反应性中作用及其机制研究　出处：《重庆医科大学》2015年硕士论文　论文类型：学位论文

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【摘要】：第一部分 断乳期小鼠RSV再次感染模型建立及意义目的：研究呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus, RSV)感染断乳期小鼠后再感染气道炎症类型及免疫应答特点。方法: 雌性C57BL/6小鼠随机分为PBS对照组(3周PBS/8周PBS)、成年期首次感染组(3周PBS/8周RSV)、再感染组(3周RSV/8周RSV)。首次或再次感染后检测小鼠体重,感染后第3、7天,处死小鼠,行支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞计数及分类计数；病理切片HE染色后行肺组织炎症病理评分；ELISA法检测BALF中细胞因子(IFN-γ、IL-4、IL-5、IL-17A)的变化。结果：体重变化：RSV感染后小鼠体重明显降低,再感染组体重下降较成年期首次感染组明显；细胞计数及分类计数：RSV感染后,成年期首次感染组BALF中的细胞总数、淋巴细胞较PBS对照组显著增加；再感染组BALF中的细胞总数、嗜酸性细胞、中性粒细胞、淋巴细胞均显著高于PBS对照组,且细胞总数、嗜酸性细胞、中性粒细胞、淋巴细胞显著高于成年期首次感染组；肺部病理：RSV感染后,成年期首次感染组及再感染组的肺组织炎症病理评分明显高于PBS对照组,而再感染组明显高于成年期首次感染组；细胞因子：RSV感染后第3天,再感染组BALF中的IFN-y及IL-17A明显高于PBS对照组及初次感染组。感染后第7天,成年期首次感染BALF中的IFN-y较PBS对照组明显增加,而IL-4、IL-5、IL-17A较PBS对照组无明显变化；再感染组BALF中的IL-4、IL-5、IL-17A较PBS对照组显著增加,而IFN-y无明显变化。结论：RSV再感染后病情较初次感染进一步加重,嗜酸性粒细胞、中性粒细胞显著升高,免疫应答为IL-4、IL-5等Th2类细胞因子与IL-17A升高,这与支气管哮喘的炎症特点相似,提示RSV反复感染可能导致支气管哮喘的发生。第二部分IFN-γ在断乳期小鼠RSV初次再次感染后气道炎症和气道高反应性中的作用及其机制研究目的：比较野生型及IFN-γ敲除C57BL/6鼠初次再次感染后气道炎症和气道高反应性差异,并研究IFN-γ在RSV初次再次感染后气道炎症和气道高反应性中的作用及其机制。方法：雌性野生型及IFN-γ敲除小鼠随机分为PBS对照组(3周PBS/8周PBS)、再次感染组(3周RSV/8周RSV)。再次感染RSV后检测小鼠体重,再次感染后第3、7天,体积描计法检测各组小鼠气道高反应性,行支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞计数及分类计数；病理切片HE染色后行肺组织炎症病理评分；ELISA法检测BALF中细胞因子(IL-4、IL-5、IL-13、IL-17A)的变化。结果：体重变化：RSV感染后小鼠体重都明显降低,野生型及敲除鼠RSV再感染组未见明显差异。肺功能：仅敲除鼠RSV再感染组检测到AHR,且明显高于其他组。细胞计数及分类计数：在感染后第3、7天,野生型及敲除鼠再次感染组BALF中细胞总数、嗜酸细胞、中性粒细胞、淋巴细胞都明显高于相应的对照组,且敲除鼠再感染组高于野生型再感染组。肺部病理：野生型及敲除鼠再次感染组在RSV感染后第3、7天都存在明显的炎症细胞浸润,且感染后第7天,敲除鼠再次感染组的病理评分明显高于野生型。细胞因子：感染后第7天,野生型再感染组BALF中IL-4、IL-5、L-17A较野生型对照组明显增加；敲除鼠再感染组L-4、IL-5、IL-13、IL-17A较敲除鼠对照组明显增加,且敲除鼠再次感染组BALF中IL-5明显高于野生型。结论:IFN-γ在再感染后起保护作用,阻断IFN-γ的作用导致AHR及气道炎症加重,其保护机制可能通过抑制IL-5、IL-13增加,从而降低Th2类细胞因子介导的AHR和气道炎症。
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R725.6

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本文编号：1327766