基于转录组测序技术的重症手足口病差异表达基因研究
发布时间:2017-12-26 03:36
本文关键词:基于转录组测序技术的重症手足口病差异表达基因研究 出处:《南华大学》2016年硕士论文 论文类型:学位论文
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【摘要】:目的:应用转录组测序技术(RNA-sequencing,RNA-seq)分析重症手足口病(sever hand,foot and mouth disease,SHFMD)患儿外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)转录组情况,筛选SHFMD显著差异表达基因(differently express genes,DEGs),为SHFMD的早期识别、及时治疗提供理论依据,为减少疾病死亡率、改善疾病愈后提供帮助。方法:收集2014年5月-2014年8月深圳市第三人民医院收治的重症和普通型手足口病(mild hand,foot and mouth disease,MHFMD)患儿各5例,以及5例健康体检儿童的外周静脉血5ml,分离PBMC并提取总RNA,采用RNA-seq技术筛选DEGs,并通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)及酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)从转录组和蛋白组水平分别对RNA-seq筛选所得DEGs结果进行再次检测。结果:RNA-seq分析示SHFMD相对健康对照组(healthy control,HC组)共117个DEGs,其中108个基因上调,9个基因下调;SHFMD相对MHFMD组共26个DEGs,其中14个基因上调,12个基因下调;两组DEGs中共有8个相同表达基因,其中S100A8、S100A12、IL-8和IL-1β表达上调,TNFRSF13C、IL-7R、THBS1和VEGFA表达下调。进一步qRT-PCR及ELISA检测结果均与RNA-seq结果一致(P0.05)。结论:1.RNA-seq技术初步建立了HFMD差异基因表达谱。2.表达上调的S100A8、S100A12、IL-8、IL-1β和表达下调的TNFRSF13C、IL-7R、THBS1、VEGFA是SHFMD差异表达基因,有望成为HFMD重症化的预测指标。
【学位授予单位】:南华大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R725.1
【参考文献】
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,本文编号:1335655
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