RSV非结构蛋白对支气管上皮细胞驱动的T淋巴细胞分化的影响

发布时间：2017-12-28 21:25

  本文关键词：RSV非结构蛋白对支气管上皮细胞驱动的T淋巴细胞分化的影响　出处：《中南大学》2013年硕士论文　论文类型：学位论文

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【摘要】：目的：人呼吸道合胞病毒(RSV)是引起严重性呼吸道疾病的主要原因之一,是引起后继哮喘发生的重要危险因素。筛选RSV的2个非结构蛋白NS1和NS2在支气管上皮中的相互作用蛋白,检测其诱发支气管上皮细胞异常信号转导,从而探究其驱动T淋巴细胞亚群漂移机制。 方法：构建含NS1或NS2基因的过表达慢病毒载体感染支气管上皮细胞,免疫共沉淀法和质谱法筛选并鉴定其相互作用蛋白；Western blot法鉴定相互作用蛋白泛素化修饰；亚硫酸盐测序检测Notch1基因甲基化；支气管上皮细胞与CD4+T淋巴细胞共培养,流式细胞术检测CD4+T淋巴细胞亚群分化,ELISA法检测共培养体系上清中细胞因子IFN-γ、IL-4、IL-17表达。 结果：(1)NSl与组蛋白H2BD相互作用,NS1与组蛋白H2BD相互作用的关键区域是NS1延伸蛋白C区；(2)NS1与组蛋白H2BD相互作用诱导组蛋白H2BD单泛素化修饰；(3)NS1诱导Notch1去甲基化改变；(4)NS1对支气管上皮细胞驱动的T淋巴细胞亚群分化无影响,NS2可抑制Th17的分化,该效应可被泛素化酶抑制剂所逆转。(5)病毒非结构蛋白对共培养体系上清中细胞因子分泌无影响。 结论：NS1与H2BD特异性结合并诱导H2BD单泛素化修饰,并进一步诱导下游靶基因Notch1的激活。NS2抑制Th17的分化,该效应可被泛素化酶抑制剂所逆转。
[Abstract]:Objective: human respiratory syncytial virus (RSV) is one of the main causes of severe respiratory diseases and is an important risk factor for the occurrence of subsequent asthma. To screen the interaction proteins of 2 non structural proteins NS1 and NS2 in bronchial epithelial cells of RSV, we detected abnormal signal transduction induced by bronchial epithelial cells, and explored the mechanism of T lymphocyte subgroup drift.
【学位授予单位】：中南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R725.6;Q51

【参考文献】

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本文编号：1347489