22q11微缺失在先天性心脏病中的检测及相关性研究

发布时间：2018-02-21 10:12

  本文关键词： 22q11微缺失 先天性心脏病 多重PCR FISH STR　出处：《南昌大学》2012年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的： 采用荧光原位杂交(FISH)及多重PCR技术对先天性心脏病患儿进行22q11微缺失检测，探讨22q11微缺失与先天性心脏病的发病及表型之间的关系；比较FISH法和多重PCR技术的优缺点。 方法： 选取200例散发先天性心脏病患儿作为实验组和120例健康儿童作为对照组，留取全血，分别进行以下实验： 1.标本进行预处理，制成浓度合适的细胞悬液，分装于2个EP管中并分别标记A组、B组； 2. A组标本：采用TUPLE1/ARSA DNA探针，结合FISH技术，检测其22q11微缺失情况； 3. B组标本：选择覆盖经典缺失区域（typical deletion region，TDR）的4个短串联重复序列多态位点（STR）：22D_4_1、22D_4_2、22D_4_3、D22S873，采用盲法，应用多重PCR技术对标本进行扩增，通过毛细管电泳观察峰值，检测22q11微缺失情况。 结果： 1.FISH检测结果显示：在200例先天性心脏病患儿中共检出22q11微缺失7例，检出率为3.5%。其中，在85例室间隔缺损患儿中检测到22q11微缺失3例，缺失率为3.5%；32例法洛氏四联症患儿中检测到22q11微缺失2例，缺失率为6.3%；26例室间隔缺损合并房间隔缺损患儿中检测到22q11微缺失2例，缺失率为7.6%。而其余先天性心脏病患儿及正常对照组儿童均未检测出22q11微缺失。 2.多重PCR检测结果显示：在200例先天性心脏病患儿中共检出22q11微缺失8例，其中7例和FISH检测结果一致，，有1例室间隔缺损患儿STR标记分析22q11微缺失结果为阳性，而该例患儿FISH检测结果为阴性。 3.以FISH法为金标准，对多重PCR方法进行如下评价：灵敏度为100%；特异度为99.48%；假阳性率约为0.52%；Kappa为0.929。 4.22q11微缺失与先天性心脏病关系：在实验组中，22q11微缺失率为3.5%（7/200）；对照组中，22q11微缺失率为0%（0/120）。经Fisher精确概率法检验，p=0.048（≤0.05），差异有统计学意义。 5.22q11微缺失与先天性心脏病表型的关系：（1）根据已检测出22q11微缺失阳性结果将实验组分为法洛氏四联症组、室间隔缺损组、室间隔缺损合并房间隔缺损组，并进行统计学分析。经Fisher精确概率法检验，p值为0.636（p＞0.05），无显著性差异；（2）将实验组中复合畸形患儿分为法洛氏四联症组（包括法洛氏四联症伴多发畸形）及其他复合畸形两组，并进行统计学分析。经Fisher精确概率法检验，p值为0.608（p＞0.05），无显著性差异；（3）将实验组分为圆锥动脉干畸形组、非圆锥动脉干畸形组进行比较，经Fisher精确概率法检验，p值为0.311（p＞0.05），差异无统计学意义。 结论： 1.22q11微缺失与先天性心脏病发病相关。 2.22q11微缺失与非综合征型先天性心脏病表型可能无关。 3.基于STR的多重PCR检测方法可用于先天性心脏病患儿22q11微缺失的筛查。
[Abstract]:Objective:
22q11 microdeletion in children with congenital heart disease was detected by fluorescence in situ hybridization (FISH) and multiplex PCR technology. The relationship between 22q11 microdeletion and the incidence and phenotype of congenital heart disease was discussed. The advantages and disadvantages of FISH and multiple PCR technology were compared.
Method锛

本文编号：1521694