胆汁淤积性肝病患儿肠道菌群及其相关细胞因子的变化

发布时间：2018-03-21 23:03

  本文选题：荧光定量多聚酶链反应　切入点：肠道菌群　出处：《广西医科大学》2012年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：第一部分健康婴儿肠道菌群检测及与分娩和喂养方式的关系 目的了解健康婴儿肠道菌群的变化,分析分娩方式和喂养方式对肠道菌群的影响。 方法收集37例健康婴儿粪便(其中阴道分娩21例,剖宫产16例；母乳喂养15例,人工喂养22例),提取粪便中细菌DNA并测量A260值；应用SYBR Green I Real-time FQ-PCR测定粪便中双歧杆菌、乳酸杆菌及大肠杆菌3种代表菌的数量。 结果阴道分娩与剖宫产婴儿相比较,母乳喂养与人工喂养婴儿相比较,粪便中细菌DNA-A260值和3种代表菌数量差异均无统计学意义。健康对照组粪便中3种细菌数(拷贝数/g湿便)的对数值分别为双歧杆菌9.49±0.59；乳酸杆菌8.58±0.32；大肠杆菌6.87±0.67。 结论健康婴儿粪便中双歧杆菌及乳酸杆菌数量占优势,大肠杆菌的数量明显较其少；不同的分娩方式、喂养方式对婴儿期肠道菌群无影响。 第二部分胆汁淤积性肝病患儿肠道菌群改变及与相关细胞因子的关系 目的研究胆汁淤积性肝病患儿肠道菌群改变；采用益生菌制剂进行干预治疗,了解其对该病治疗效果的影响及其相关细胞因子的变化。 方法(1)采用SYBR Green I Real-time FQ-PCR法检测胆汁淤积性肝病患儿肠道细菌,比较其与健康对照组肠道3种代表细菌的数量；比较益生菌干预和非干预组肠道3种代表细菌的数量在治疗前后变化。(2)检测病例组治疗前后肝功能、血氨水平、胆固醇等肝脏功能指标；同时采用ELISA法测定病例组血清TGF-β1、TNF-α和IL-6三种细胞因子水平。 结果(1)与健康对照组比较,胆汁淤积性肝病患儿粪便中双歧杆菌、乳酸杆菌数量显著下降,大肠杆菌数量明显上升；(2)益生菌干预组粪便中双歧杆菌、乳酸杆菌数量显著上升,大肠杆菌数量减少；(3)治疗后肝功能指标有所下降,TNF-α及IL-6水平只在治疗后的干预组中有下降,且血氨水平在治疗后的干预组中下降更明显；相关分析表明肠道菌群B/E值与IL-6水平呈显著负相关关系。 结论胆汁淤积性肝病患儿存在明显的菌群紊乱,肠道菌群紊乱可能影响血清细胞因子的表达；微生态制剂干预治疗对胆汁淤积性肝病组肠道菌群恢复和平衡免疫功能有一定的作用。
[Abstract]:The relationship between intestinal microflora and delivery and feeding methods in healthy infants. Objective to investigate the changes of intestinal flora in healthy infants and to analyze the effect of delivery and feeding on intestinal flora. Methods the feces of 37 healthy infants (including 21 cases of vaginal delivery, 16 cases of cesarean section), 15 cases of breast-feeding and 22 cases of artificial feeding were collected to extract bacterial DNA from feces and measure A260 value. SYBR Green I Real-time FQ-PCR was used to measure bifidobacterium in feces. The number of Lactobacillus and Escherichia coli. Results the vaginal delivery was compared with the cesarean section, and the breast-feeding was compared with the artificial feeding. The logarithmic values of the three bacteria (copy number / g wet stool) were 9.49 卤0.59 for Bifidobacterium, 8.58 卤0.32 for Lactobacillus and 6.87 卤0.67 for Escherichia coli, respectively. Conclusion Bifidobacterium and Lactobacillus are dominant in feces of healthy infants, and the number of Escherichia coli is less than that of E. coli, but different delivery and feeding methods have no effect on intestinal flora in infancy. The change of intestinal flora and its relationship with cytokines in children with cholestatic liver disease. Objective to study the changes of intestinal flora in children with cholestatic liver disease, and to investigate the effect of probiotics on the therapeutic effect of cholestatic liver disease and the changes of related cytokines. Methods SYBR Green I Real-time FQ-PCR was used to detect intestinal bacteria in children with cholestatic liver disease. The liver function, blood ammonia level, cholesterol and so on were measured before and after treatment by comparing the number of three representative bacteria in the intestinal tract of probiotic intervention group and non-intervention group before and after treatment. Serum levels of TGF- 尾 1 TNF- 伪 and IL-6 were measured by ELISA method. Results 1) compared with the control group, the number of Bifidobacterium and Lactobacillus in the feces of children with cholestatic liver disease decreased significantly, the number of Escherichia coli increased significantly.) in the probiotics intervention group, the number of bifidobacterium and Lactobacillus increased significantly in the feces of children with cholestatic liver disease. After treatment, the levels of TNF- 伪 and IL-6 decreased only in the intervention group, and the blood ammonia level decreased more obviously in the intervention group after treatment. Correlation analysis showed that there was a significant negative correlation between the B / E value of intestinal flora and the level of IL-6. Conclusion Children with cholestatic liver disease have obvious microflora disorder, and intestinal microflora disorder may affect the expression of serum cytokines. The intervention of microecological preparation has certain effect on the recovery of intestinal flora and the balance of immune function in patients with cholestatic liver disease.
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R725.7

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本文编号：1645939