COX-2抑制剂对高氧新生大鼠肺组织保护机制和肺组织AQP-1、NF-κB表达的影响

发布时间：2018-04-19 03:11

本文选题：高氧肺损伤 + 水通道蛋白-1　；参考：《青岛大学》2017年硕士论文

【摘要】：目的:1.建立新生Sprague Dawley(SD)大鼠高氧肺损伤动物模型,观察新生大鼠肺组织结构的病理改变;2.比较高氧肺损伤时水通道蛋白-1(AQP-1)、核转录因子kappa B(NF-κB)的表达变化趋势,探讨AQP-1、NF-κB在肺损伤发病机制中的作用;3.探讨环氧合酶2(COX-2)抑制剂塞来昔布干预后是否对高氧诱导的肺组织损伤有保护作用,为防治高氧环境下的肺损伤提供依据。方法:1.建立新生大鼠高氧肺损伤的动物模型:将出生一天内的新生SD大鼠(雌雄不限)105只随机分为三组(n=35):Ⅰ组:空气组(空气+腹腔注射DMSO);II组:高氧组(85%氧气+腹腔注射DMSO);Ⅲ组:塞来昔布干预组(85%氧气+腹腔注射塞来昔布)。2.Ⅰ组新生大鼠自由呼吸空气饲养,每天固定时间点注射DMSO(5ml/kg)。Ⅱ组、Ⅲ组新生大鼠置于密闭85%高氧箱中饲养。Ⅱ组于实验第一天起每天固定时间点腹腔注射DMSO(5ml/kg)。Ⅲ组于实验第一天起同一时间点腹腔注射塞来昔布5mg/kg。3.分别在实验第3d、7d、14d各组随机抓取8只大鼠并处死,取肺组织标本检测下列指标:(1)右下肺组织行苏木精-伊红(HE)染色观察其病理学变化;(2)右中上肺组织一部分应用免疫组化染色法观察肺组织中AQP-1、NF-κB含量,另一部分应用凋亡染色法观察肺组织细胞生长发育情况。结果:1.各组大鼠实验期间一般情况:Ⅰ组(空气组)中的实验大鼠反应良好,生长发育正常,无死亡现象。Ⅱ组(高氧组)中的实验大鼠逐渐出现症状,表现为精神萎靡,反应迟钝,活动量明显减少,脱氧后呼吸困难,烦躁不安明显,实验期间死亡4只。Ⅲ组(干预组)中的实验大鼠一般情况较高氧组明显改善,实验期间死亡1只。2.肺组织病理学改变:Ⅰ组(空气组)实验大鼠各时间点肺组织肺泡大小均一,结构完整,肺泡腔内未见渗液及炎症细胞浸润。Ⅱ组(高氧组)实验大鼠在高氧暴露3d后出现液性渗出,可见有肺毛细血管扩张,肺泡腔扩大,腔内可见炎性细胞浸润。7d后肺泡腔内可见出血,液体渗出较多,炎症细胞浸润较3d时明显加重,肺组织结构紊乱,部分肺泡细胞破坏并出现肺大泡。14d时肺组织结构破坏更为明显,肺泡—毛细血管膜、肺间隔明显增厚,成纤维细胞增生出现纤维化表现。Ⅲ组(干预组)各时相肺组织形态学改变均较高氧组明显改善。3.肺组织AQP-1、NF-κB蛋白的表达:各时相点高氧组(Ⅱ组)实验大鼠同空气组(Ⅰ组)实验大鼠相比,肺组织AQP-1蛋白表达水平明显下降(P0.01),NF-κB蛋白表达水平明显升高(P0.01),塞来昔布干预组(Ⅲ组)实验大鼠肺组织AQP-1蛋白表达水平较高氧组(Ⅱ组)明显增加(P0.01),NF-κB蛋白表达较高氧组(Ⅱ组)明显减少(P0.01)。4.肺组织在空气组、高氧组、干预组肺泡细胞凋亡的变化:在各时相点,高氧组(Ⅱ组)实验大鼠同空气组(Ⅰ组)实验大鼠相比,肺组织细胞凋亡数明显增加(P0.01),塞来昔布干预组(Ⅲ组)实验大鼠肺组织细胞凋亡数较高氧组(Ⅱ组)明显减少(P0.01)。结论:1.长时间吸入高浓度氧气可致新生大鼠发生肺损伤,表现为肺泡内炎性液体渗出及炎症细胞浸润;肺组织结构紊乱,肺泡-毛细血管膜、肺间隔明显增厚,成纤维细胞增生等。2.高氧肺损伤时,AQP-1蛋白表达水平较空气组明显下降,提示在高氧肺损伤时可能有肺泡上皮细胞膜受损或功能障碍;NF-κB蛋白表达水平较空气组明显增加,提示其在肺损伤过程中具有重要作用。3.高氧肺损伤时,肺组织细胞凋亡数较空气组明显增加,正常肺泡细胞数显著降低,提示高氧可引起肺泡细胞损伤,减少正常细胞寿命,加速细胞凋亡过程;4.高氧环境下的新生大鼠,腹腔注射塞来昔布后可促进AQP-1蛋白表达,抑制NF-κB的激活,减少炎症因子的表达,减轻对肺泡上皮细胞的损害,抑制正常肺泡细胞的凋亡,对高氧肺损伤具有一定的保护作用。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R722.6

【参考文献】