儿童系统性红斑狼疮淋巴细胞亚群分析及WAS蛋白缺陷导致Tfh固有缺陷的研究

发布时间：2018-05-11 17:09

  本文选题：儿童系统性红斑狼疮 + 淋巴细胞亚群　； 参考：《重庆医科大学》2017年硕士论文

【摘要】：第一部分儿童系统性红斑狼疮淋巴细胞亚群分析目的:分析系统性红斑狼疮患儿在不同疾病时期,淋巴细胞亚群数量变化情况。探讨淋巴细胞亚群在儿童系统性红斑狼疮发病与疾病转归的关系,为患儿早期诊断和及时干预治疗提供线索。方法:2015年3月至2016年12月,收集到我院就诊的29例系统性红斑狼疮患儿外周血(女:男=6.5:1),分为初发组15例,稳定组14例,同龄健康儿童15例。采用流式细胞术(Flow cytometry)检测不同疾病时期下的SLE患儿外周血中主要淋巴亚群(T、B和NK细胞)及T、B细胞部分亚群比例及数量变化。以及γδT细胞,Tfh细胞,Treg细胞亚群比例的变化。结果:稳定组SLE患儿CD3+T细胞的比例及绝对数均高于对照组及初发组;同时,初发组CD3+T细胞的比例及绝对值低于对照组;稳定组患儿CD8+T细胞的比例及绝对值均高于初发组;初发组B细胞的比例高于对照组及稳定组;其他细胞亚群绝对数三组间无明显差异。稳定组患儿CD4+EM细胞比例明显高于初发组及正常对照,其CD4+Naive绝对值低于对照组,其余Th细胞亚群比例及绝对数无明显差异。稳定组患儿CD8+TEMRA比例及绝对值均高于对照组,初发组患儿CD8+Naive绝对值低于正常组,其余CD8+T细胞亚群比例及绝对值三组间无明显差异。稳定期患儿Na?ve细胞百分比及绝对值均低于初发组及正常对照组,其余B细胞亚群比例及绝对数在三组间无明显差异。初发组SLE患儿与稳定组SLE患儿γδT比例均显著低于对照组。SLE患儿Tfh细胞比例,ICOS及PD-1在Tfh中比例均明显低于对照组。初发组与稳定组患儿非抑制性Treg(non-Treg)细胞比例均明显高于正常对照,初发组患儿活化Treg(a Treg)细胞比例高于稳定组及对照组。静息期Treg三组间无统计学差异结论:SLE患儿外周血淋巴亚群比例失调,同时伴有部分Tc、Th及B细胞亚群的比例变化,提示免疫细胞比例和或绝对数量的紊乱可能是参与SLE的发病。其中SLE患儿γδT细胞明显下降,提示了γδT在其发病中可能有重要作用。此外,非抑制性Treg(non-Treg)细胞比明显高于正常对照,可能提示导致患儿免疫抑制能力的下降,进而出现免疫过激状态,导致了疾病发生或进展。最后,稳定组患儿c Tfh细胞数量的下降提示Tfh细胞可能作为反映治疗效果的一项临床指标,用以评估患儿的疾病转归及预后。第二部分WAS蛋白缺陷导致Tfh固有缺陷的研究目的:前期我们的研究发现WASp缺陷时人及基因敲除小鼠的Tfh细胞数量和功能出现明显缺陷,但该Tfh缺陷是由于T细胞发育的自身因素所致还是在Tfh发育分化中其他细胞的外在影响所致并不清楚。本研究旨在通过骨髓嵌合鼠动物模型,明确WASKO小鼠Tfh细胞的减少是否为WASp缺陷引起的固有缺陷,进一步对该病的发病机制进行探讨,最终为WAS患儿的临床治疗提供新的可能的方向。方法:将表达CD45.2的WASKO小鼠/WT小鼠骨髓细胞与表达CD45.1的WT小鼠的骨髓细胞按照1:1等比例混合后移植给经致死剂量辐照后的CD45.1的WT小鼠,建立骨髓嵌合鼠动物模型。移植8周干细胞重建成功后,用NP-KLH免疫部分小鼠,2周后检测受体小鼠CD45.2阳性的Tfh细胞比例,ICOS+Tfh细胞比例,PD-1+Tfh细胞比例,以及Tfh细胞增殖和凋亡情况。结果:移植成功的骨髓嵌合鼠,免疫前后WASKO组CD45.2+Tfh细胞比例与对照组相比明显下降,同时ICOS+Tfh细胞比例及PD-1+Tfh细胞比例也明显下降,同时Tfh细胞的增殖水平降低,凋亡增加。结论:本研究发现WAS蛋白缺陷时,WASKO小鼠Tfh细胞有明显减少,表现为Tfh细胞增殖能力减弱,凋亡增多。以上发现提示,WAS蛋白缺陷时,Tfh细胞存在固有的缺陷,WASp与Tfh的产生有着密切关系。
[Abstract]:The proportion and absolute value of CD3 + T cells in children with SLE were significantly lower than those in control group . 鍓嶆湡鎴戜滑鐨勭爺绌跺彂鐜癢ASp缂洪櫡鏃朵汉鍙婂熀鍥犳暡闄ゅ皬榧犵殑Tfh缁嗚優鏁伴噺鍜屽姛鑳藉嚭鐜版槑鏄剧己闄，

本文编号：1874829