抗生素致咽部菌群失调对RSV感染后气道反应的影响

发布时间：2018-11-09 14:46

【摘要】：第一部分抗生素致咽部菌群失调对R S V感染后气道炎症及气道高反应的影响 目的探讨咽部菌群失调对RSV感染后气道炎症及气道高反应的影响。 方法将3周龄雌性BALB/c分为4组,分别为：空白对照组,抗生素组,RSV感染组及RSV感染+抗生素组。在感染后第4天,随机抽取小鼠将其肺匀浆进行培养及PCR检测,对RSV感染进行验证。在感染后第8天,取所有小鼠的咽拭子进行培养并PCR测序验证。感染后第8天及第15天对各组小鼠进行肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid, BALF)炎症细胞分类计数、病理切片HE染色及气道高反应(airway hyperresponsiveness,AHR)检测。 结果肺匀浆培养结果及PCR测序结果证明RSV成功感染小鼠。PCR及测序结果证明抗生素的使用造成了小鼠咽部菌群失调,而单独RSV感染不能影响气道菌群。RSV感染后第8天,BALF中炎症细胞明显增多,肺部病理损伤加重,无AHR。在感染后第15天,BALF中炎症细胞较感染后第8天减少,肺部病理损伤减轻,无AHR。RSV感染+抗生素组与RSV感染组相比,未在感染后第8天产生任何差异,但在感染后第15天激发出AHR。在此两个时间点,上述检测在抗生素组和空白对照组之间未见差异。 结论RSV感染后急性期肺部炎症加重,在此基础上抗生素致咽部菌群失调可以在后期造成AHR。抗生素致咽部菌群失调会激发RSV感染后AHR。 第二部分抗生素致咽部菌群失调对RSV感染后肺部Treg细胞的影响 目的探讨抗生素致咽部菌群失调对RSV感染后肺部Treg细胞的影响。 方法将3周龄雌性BALB/c分为4组,分别为：空白对照组,抗生素组,RSV感染组及RSV感染+抗生素组。感染后第8天及第15天利用流式细胞术对各组小鼠肺部Treg细胞进行检测。感染后第15天分别利用RT-PCR及ELISA对肺部Foxp3mRNA的表达和BALF中IL-10及TGF-β的水平进行检测。 结果RSV感染后第8天及第15天,肺部Treg细胞比例上调。而在RSV感染后第15天,抗生素致咽部菌群失调抑制了肺部Treg细胞的增殖。仅单独使用抗生素也会降低肺部Treg细胞的比例。在RSV感染后第15天,肺部Foxp3mRNA的表达上升；而咽部菌群失调抑制RSV感染后肺部Foxp3mRNA的表达。感染后第15天,RSV感染组BALF中IL-10的水平上升,而RSV感染+抗生素组BALF中的IL-10水平上升更明显。各组BALF中TGF-β的水平未见明显差异。 结论RSV感染诱导肺部Treg细胞的增殖,而抗生素致咽部菌群失调会抑制RSV感染后肺部Treg细胞的增殖。 第三部分抗生素致咽部菌群失调对RSV感染后肺部CD11c-细胞的影响 目的探讨抗生素致咽部菌群失调对RSV感染后肺部CD11c+细胞的影响。 方法将3周龄雌性BALB/c分为3组,分别为：空白对照组,RSV感染组及RSV感染+抗生素组。感染后第8天利用流式细胞术对各组小鼠肺部CD11c+细胞的MHC-Ⅱ、CD80、CD86及CD40进行检测。 结果RSV感染后第8天,肺部CD11c+细胞上MHC-Ⅱ、CD80、CD86及CD40阳性细胞比例上调,MHC-Ⅱ和CD80的平均荧光强度增强,细胞趋于成熟状态。而在RSV感染+抗生素组,CDllc+细胞上MHC-Ⅱ和CD80的表达降低,接近于空白对照组水平。 结论RSV感染诱导肺部CD11c+细胞的成熟,而抗生素致咽部菌群失调会抑制RSV感染后肺部CD11c+细胞的成熟。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R725.1

【共引文献】

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本文编号：2320719