白介素17及细胞因子信号转导抑制蛋白3在中性粒细胞性哮喘小鼠发病机制中的作用研究

发布时间：2018-12-08 08:44

【摘要】：第一部分中性粒细胞性哮喘小鼠模型建立的探索目的利用不同剂量脂多糖(LPS)干预卵清蛋白(OVA)致敏及激发的小鼠,探索中性粒细胞性哮喘(NA)小鼠模型的建立,同时为第二部分研究提供动物模型。方法80只BALB/c小鼠随机分为A组(正常对照组)、B组(肺损伤对照组：B1-B4)、C组(嗜酸细胞性哮喘模型对照组)、D组(中性粒细胞性哮喘模型组：D1-D4)。分致敏和激发两阶段建模,致敏阶段：A组PBS腹腔注射及PBS滴鼻,B组PBS腹腔注射及LPS滴鼻,C组OVA腹腔注射,D组OVA腹腔注射及LPS滴鼻；激发阶段：A组及B组生理盐水雾化,C组及D组5%OVA雾化,致敏阶段第0天、第7天、第14天共处理3次,雾化阶段即第21-34天连续雾化两周,30min/(次·天)。通过观察小鼠雾化时的症状、镜下肺组织病理改变,检测支气管肺泡灌洗液(BALF)炎症细胞总数及其分类计数、血清OVA-sIgE水平等评价NA小鼠模型的建立。结果(1)D3组小鼠出现类似C组小鼠呼吸急促、大小便失禁等表现,且两组症状持续时间无明显区别。(2)D3组BALF炎症细胞总数较A组显著升高(P0.01)；其中性粒细胞百分比(NEU%)较A、C、D1、D2组显著升高(均P0.01),嗜酸性粒细胞百分比(EOS%)较A组显著升高而较C组显著低下(均P0.01),B、D4组均以NEU%升高为主而EOS%升高不明显。(3)D3组支气管管壁及肺泡间隔增厚变形,部分断裂,气道黏膜下除了EOS浸润外还存在较多NEU浸润。(4)D3组血清OVA-sIgE水平显著高于A组而低于C组(均P0.05)。(5)D3组IL-4水平显著高于A组(P0.05)而与C组无显著差异(P0.05)；D3组IFN-y水平显著低于A组(P0.05)而与C组无显著差异(P0.05)。结论10μg LPS滴鼻吸入+50μg OVA腹腔注射三次与5%OVA连续激发两周(即D3组)可成功建立NA小鼠模型。第二部分白介素17及细胞因子信号转导抑制蛋白3在中性粒细胞·性哮喘小鼠发病机制中的作用研究目的初步探讨白介素17(IL-17)及细胞因子信号转导抑制蛋白3(SOCS3)在中性粒细胞性哮喘(NA)小鼠发病机制中的作用方法参考第一部分建模方法设立NC组(正常对照组),EA组(嗜酸细胞性哮喘模型组),NA组(中性粒细胞性哮喘模型组)。通过检测各组支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-17水平及肺组织SOCS3的表达,初步探讨IL-17及SOCS3在NA小鼠发病机制中的作用。结果(1)EA组、NA组小鼠出现呼吸急促、大小便失禁等表现。(2)EA组、NA组小鼠肺组织支气管管壁及肺泡间隔增厚变形,部分断裂,EA组小鼠肺组织气道黏膜下嗜酸性粒细胞(EOS)浸润较中性粒细胞(NEU)浸润明显,而NA组则以NEU浸润更明显。(3)EA组、NA组BALF炎症细胞总数较NC组显著升高(P0.01)；EA组嗜EOS%较NC组、NA组显著升高(均P0.01),NA组NEU%较NC组、EA组显著升高(均P0.01)。(4)NA组血清OVA-sIgE水平显著高于NC组而低于EA组(均P0.05)。(5)NC组BALF中IL-17水平较NC组、EA组显著升高(均P0.01),且IL-17水平与NEU%显著正相关(rs=0.583,P0.05)。(6)EA组、NA组小鼠肺组织SOCS3表达较NC组显著增强,其中EA组表达最强且主要分布气道上皮细胞及炎症细胞胞浆,而NA组主要分布气道上皮细胞胞浆。(7)WB法检测各组小鼠肺组织SOCS3表达均为阴性表达。结论NA小鼠BALF中IL-17水平升高,且与BALF中NEU%明显正相关,IL-17可能参与介导NA小鼠发病。
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【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R725.6

【参考文献】