滤泡辅助性T细胞在儿童特发性肾病综合征低IgG血症中的作用初探

发布时间：2019-01-17 15:40

【摘要】：目的:探讨滤泡辅助性T细胞(T follicular helper cell,Tfh)在儿童特发性肾病综合征(idiopathic nephritic syndrom,INS)低Ig G血症中的可能作用和机制。方法:激素敏感型INS患儿40例,其中INS初发组和INS缓解组各20例,同年龄正常对照组20例。采用流式细胞术检测外周血中循环Tfh细胞、CD19+CD27-Ig D+B细胞(初始B细胞)、CD19+CD27+Ig D+B细胞(转化前记忆B细胞)、CD19+CD27+Ig DB细胞(转化后记忆B细胞)、CD19+CD27+Ig D-CD38high B细胞(浆细胞)比例;Real-Time PCR检测CD4+T细胞PI3K、AKT、m TOR、m TORC1、m TORC1、BCL-6、Blimp-1及IL-21基因表达;ELISA检测血浆IL-2、IL-21及IL-6浓度,免疫荧光吸附试验检测血浆丙二醛(malondialdehyde,MDA)浓度。INS初发患儿T细胞分别在正常儿童血浆和INS患儿血浆培养后应用流式细胞术检测Tfh细胞比例、PCR检测m TOR、m TORC1的表达。结果:与正常对照组相比,(1)INS初发组患儿外周血Tfh比例明显降低(P0.05),缓解组Tfh比例无明显差异(P0.05);(2)初发组患儿转化后记忆B细胞和浆细胞比例明显降低(P0.05),缓解组无明显差异(P0.05)(3)初发组患儿Tfh细胞转录因子BCL-6表达明显降低(P0.05),Blimp-1、PI3K、AKT、m TOR、m TORC1表达明显增高(P0.05),缓解组无明显差异(P0.05);m TORC2表达无明显差异;INS初发组患儿CD4+T细胞IL-21m RNA表达明显降低(P0.05);(4)INS初发组患儿血浆IL-2明显降低(P0.05),IL-21、IL-6浓度呈下降趋势,统计学分析无显著差异(P0.05);(5)INS初发组患儿MDA浓度显著增高(P0.05);(6)INS患儿CD4+T细胞加正常血清培养后INS患儿m TOR基因表达明显降低(P0.05),Tfh细胞比例明显增加(P0.05)。结论:(1)Tfh比例下降影响B细胞分化成熟,可能是导致INS患儿低IgG血症的原因之一;(2)IL-2、IL-21等细胞因子微环境紊乱导致的BCL-6/Blimp-1表达失衡,高脂血症和IL-2通过PI3K-AKT途径引起m TOR(m TORC1)过表达等多种因素,可能是抑制INS患儿Tfh细胞分化的重要原因。
[Abstract]:Objective: to investigate the possible role and mechanism of follicular helper T cell (T follicular helper cell,Tfh in hypoglycemia of (idiopathic nephritic syndrom,INS in children with idiopathic nephrotic syndrome. Methods: 40 children with steroid-sensitive INS were enrolled in this study, including 20 cases in the first onset group of INS and 20 cases in the remission group of INS, and 20 cases in the normal control group at the same age. Circulating Tfh cells, CD19 CD27-Ig D B cells (initial B cells), CD19 CD27 Ig D B cells (pre-transformed memory B cells) and CD19 CD27 Ig DB cells (post-transformed memory B cells) were detected by flow cytometry. Ratio of CD19 CD27 Ig D-CD38high B cells (plasma cells); PI3K,AKT,m TOR,m TORC1,BCL-6,Blimp-1 and IL-21 gene expression in CD4 T cells were detected by Real-Time PCR. ELISA was used to detect plasma IL-2,IL-21 and IL-6, and immunofluorescence adsorption assay was used to detect plasma malondialdehyde (malondialdehyde,). The concentration of MDA. The percentage of Tfh cells was detected by flow cytometry and the expression of m TOR,m TORC1 was detected by PCR after the T cells were cultured in normal children's plasma and INS children's plasma respectively. Results: compared with normal control group, (1) the proportion of peripheral blood Tfh in INS group was significantly lower than that in control group (P0.05), but there was no significant difference in Tfh ratio in remission group (P0.05). (2) the ratio of memory B cells and plasma cells decreased significantly in the primary group (P0.05), but there was no significant difference in the remission group (P0.05). (3) the expression of transcription factor BCL-6 of Tfh cells in the primary group was significantly decreased (P0.05). The expression of Blimp-1,PI3K,AKT,m TOR,m TORC1 was significantly increased (P0.05), but there was no significant difference in remission group (P0.05). There was no significant difference in the expression of m TORC2, and the expression of IL-21m RNA in CD4 T cells was significantly decreased in the primary INS group (P0.05). (4) the plasma IL-2 decreased significantly (P0.05) and the concentration of IL-21,IL-6 decreased (P0.05) in the primary INS group. There was no significant difference between the two groups (P0.05); (5). The MDA concentration in the primary INS group was significantly higher (P0.05). (6) the expression of m TOR gene in INS children was significantly decreased after CD4 T cells were cultured with normal serum (P0.05) and the proportion of), Tfh cells was significantly increased (P0.05). Conclusion: (1) the decrease of Tfh ratio affects the differentiation and maturation of B cells, which may be one of the causes of hypoIgG in children with INS. (2) the imbalance of BCL-6/Blimp-1 expression caused by microenvironmental disturbance of cytokines such as IL-2,IL-21, hyperlipidemia and overexpression of m TOR (m TORC1 induced by IL-2 via PI3K-AKT pathway, and so on. It may be an important reason to inhibit the differentiation of Tfh cells in children with INS.
【学位授予单位】：遵义医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R726.9

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本文编号：2410186