窒息对新生小鼠心脏β受体的影响研究

发布时间：2019-07-26 16:08

【摘要】：目的:探讨窒息对新生小鼠β受体的影响及β_2受体激动剂对未成熟心肌细胞是否具有保护性。方法:第一部分取出生3天的ICR小鼠36只,随机数字表法编号,分别于小鼠生后3、5、7、14、21、28天随机从中各取6只,开胸取出心肌组织,分别进行免疫组化及western蛋白印迹法检测心肌β_1、β_2受体表达。第二部分取出生3天的ICR小鼠12只,采用随机数字表法随机分为2组,对照(Control,CTL)组(n=6只)仅置于广口瓶中,不做窒息处理。窒息(Asphyxia,AS)组(n=6只)参照新生鼠常压窒息模型进行窒息处理,各组小鼠均开胸取出心肌组织,分别进行免疫组化及western蛋白印迹法检测心肌β_1、β_2受体表达。第三部分取出生3天的小鼠36只,采用随机数字表法随机分为3组,CTL组(n=12只)仅置于广口瓶中,不做窒息处理。AS组(n=12只)参照新生鼠常压窒息模型进行窒息处理。非诺特罗(Fenoterol,FEN)组(n=12只)在窒息处理前2小时予以非诺特罗前期给予1次,余处理同AS组。分别在各组小鼠出生3天、28天行心脏超声检测小鼠心率及左心室射血分数,开胸取心脏组织,免疫组化及western蛋白印迹法检测心肌β_1、β_2受体表达。结果:1.CTL组出生第3、5、7、14、21、28天各组小鼠β_1受体表达随着鼠龄增长逐渐增加,28天小鼠β_1受体表达明显高于3天小鼠(P0.05);2.CTL组出生第3、5、7、14、21、28天各组小鼠β_2受体表达随着鼠龄增长逐渐减少,28天小鼠β_2受体表达明显低于3天小鼠(P0.05);3.与CTL组相比,AS组3天小鼠心肌β_1、β_2受体均出现明显下调(P0.05);4.CTL组3天正常小鼠心肌细胞排列整齐,细胞核清晰,细胞膜完整,无炎性细胞渗出、心肌细胞水肿及坏死。AS组3天小鼠进行窒息处理后,心肌细胞排列紊乱,有少许炎性细胞渗出。AS组3天小鼠相比于CTL组,心率上升(P0.05),LVEF%明显降低(P0.05),HB/WB比对比无明显差异(P0.05),提示心肌损伤;5.与CTL组28天小鼠相比,AS组HW/BW比升高,FEN组HW/BW比降低,FEN组较AS组HW/BW降低(P0.05);6.与CTL组28天小鼠相比,AS组心率降低,FEN组心率升高,但三组组间互无明显差异(P0.05);7.与CTL组28天小鼠相比,FEN组及AS组LVEF%均降低,FEN组对比AS组LVEF%升高(P0.05);8.与CTL组28天小鼠相比,FEN组及AS组β_1、β_2受体表达均降低,FEN组β_1受体相比于AS组有升高趋势,无统计学意义(P0.05),FEN组β_2受体相比于AS组有升高趋势(P0.05)。结论:1.正常小鼠心肌β_1、β_2受体表达在一定的时间段内可以随着鼠龄变化而发生改变,主要表现为β_1受体表达上调,β_2受体下调;2.窒息3天小鼠出现心率增快、LVEF%下降,提示窒息可以引起心肌损伤;3.窒息所致新生3天小鼠心肌损伤后,心肌β_1、β_2受体均出现大量下调;4.特异性β_2受体激动剂非诺特罗处理后的窒息小鼠相比于单纯窒息小鼠,HW/BW更低,LVEF%升高,β_2受体增加,提示非诺特罗可以改善心肌功能,可能是通过提高β_2受体活性来发挥作用。
【图文】：

18图 2 3d 小鼠窒息心肌细胞 β 受体表达变化（A）3d 小鼠窒息损伤后心肌细胞 β 受体免疫组化结果,可见窒息后小鼠心肌 β1、β2受体染色均变浅，，表达出现下调的趋势；（B）3d 小鼠窒息损伤后心肌细胞 β 受体 western blot 表达结果；（C）3d 小鼠窒息后心肌细胞 β1受体蛋白表达统计图，n=6，P<0.05，CTL3d vs.AS 3d；（D）3d 小鼠窒息后心肌细胞 β2受体蛋白表达统计图，n=6，P<0.05，CTL3d vs.AS 3d。

25图 3 窒息 3d 和 28d 小鼠各组 β 受体蛋白表达及心功能指标变化（A）3d、28d 小鼠 CTL、AS、FEN 各组心肌细胞 β1受体免疫组化结果；（B）3d、28d 小鼠CTL、AS、FEN 各组心肌细胞 β2受体免疫组化结果；（C）3d、28d 小鼠 CTL、AS、FEN 各组心肌细胞 β 受体蛋白 western blot 表达变化；（D）3d、28d 小鼠 CTL、AS、FEN 各组心肌细胞 β1受体蛋白表达统计图，n=6，P>0.05，FEN 28d vs.AS 28d；（E）3d、28d 小鼠 CTL、AS、FEN 各组心肌细胞 β2受体蛋白表达统计图，n=6，P<0.05，FEN 28d vs. AS 28d；(F) 3d、28d小鼠 CTL、AS、FEN 各组心率统计图，n=6，P>0.05，FEN 28d vs.AS 28d；(G) 3d、28d 小鼠CTL、AS、FEN 各组 HW/BW 统计图，n=6，P<0.05，FEN 28d vs. AS 28d；（H）3d、28d 小
【学位授予单位】：湖北医药学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R722.12

【参考文献】

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本文编号：2519654