肠道微生物对Caco-2肠上皮细胞单层屏障作用的机制研究

发布时间：2019-11-29 19:13

【摘要】：目的：利用Caco-2肠上皮细胞单层屏障模型研究四种肠道微生物对肠道屏障的影响。 方法：建立Caco-2肠上皮细胞单层屏障模型，碱性磷酸酶检测细胞极性。将实验分为空白对照组、大肠埃希菌组、肺炎克雷伯菌组、粪肠球菌组、乳酸杆菌组，，在各组细菌作用下，Millicell-ERS电阻测定仪测定Caco-2肠上皮细胞单层跨上皮细胞电阻TEER值变化、酶标仪检测荧光黄通过率的变化；酶联免疫吸附法（ELISA）检测单层细胞zonulin；电镜观察细胞间紧密连接超微结构变化；免疫荧光、Westernblot方法检测紧密连接（TJ）相关蛋白Occludin、Claudin-1、ZO-1表达、分布和超微结构变化。所有数据采用均数标准差表示，P＜0.05认为差异有统计学意义，采用SPSS17.0统计软件进行统计分析。 结果：碱性磷酸酶测定细胞单层呈明显极性，TEER值稳定在250 3

本文编号：2567580