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增生性贫血患儿骨髓单个核细胞转铁蛋白受体2表达情况及其意义

发布时间:2020-03-22 07:59
【摘要】: 目的 研究增生性贫血患儿骨髓单个核细胞转铁蛋白受体2(transferrin receptor 2,TfR2)表达情况,分析TfR2表达水平与贫血程度、骨髓红系增生程度、基础疾病种类和铁状况等指标的相关关系,探讨TfR2在红系造血方面的作用和在增生性贫血诊断方面的应用价值。 方法 实验组系我院儿童血液肿瘤科收治的40例增生性贫血患者,对照组系经骨髓检查排除红系疾病和血液系恶性肿瘤的10例患者。收集研究对象骨髓抗凝标本,密度梯度离心方法提取制备骨髓单个核细胞,Trizol试剂提取细胞总RNA,逆转录后荧光定量PCR方法检测TfR2 mRNA表达水平。以目标基因TfR2和管家基因GAPDH起始拷贝数之比判断TfR2相对表达量。统计分析TfR2相对表达量与临床、血液学、骨髓检查和铁代谢指标的相关关系。 结果 1.实验组骨髓单个核细胞TfR2相对表达量的中位数为5.58,对照组为0.0518,两组差异有统计学意义(P<0.001)。 2.TfR2相对表达量与贫血程度具有明显相关关系。轻度贫血组TfR2相对表达量的中位数为0.1971,与对照组比较无统计学差异(P=0.419),提示轻度贫血可能尚不足以显著刺激TfR2表达上调。但中度贫血和(极)重度贫血组TfR2相对表达量显著高于轻度贫血组和对照组(P<0.05和P<0.001),其TfR2相对表达量的中位数分别为3.83和6.79。等级相关统计分析表明,实验组TfR2相对表达量与外周血Hb含量呈负相关关系(r_s=-0.715,P<0.001)。 3.缺铁性贫血组、地中海贫血组和其他溶血性贫血组TfR2相对表达量的中位数分别为4.13、7.63和2.34,与对照组相比均具有统计学显著性差异(P≤0.001),但不同基础疾病组间比较差异无显著性(P=0.537),说明TfR2表达受贫血及其程度影响,,而与基础疾病无关。 4.增生性贫血患者不同铁状况组间TfR2相对表达量无显著差异。 5.等级相关统计分析表明,实验组TfR2相对表达量与骨髓幼红细胞比例呈正相关关系(等级相关系数r_s=0.533,P<0.001),而外周血Hb含量与骨髓幼红细胞比例呈负相关关系(等级相关系数r_s=-0.488,P=0.001)。 结论 1.增生性贫血患儿骨髓单个核细胞TfR2表达量显著高于对照组,提示TfR2表达水平与骨髓增生程度密切相关,可能在红系造血方面发挥着重要作用。 2.TfR2表达水平与外周血Hb含量呈负相关关系,但与导致增生性贫血的基础疾病无关,提示贫血(尤其是中重度贫血)是影响TfR2表达的重要因素。贫血可能通过引起组织缺氧等下游效应诱导TfR2表达,TfR2可能是红系造血中的一个重要的调节分子。 3.TfR2表达水平与骨髓幼红细胞比例呈正相关关系,而外周血Hb含量与骨髓幼红细胞比例呈负相关关系。结合国外关于TfR2高水平表达于胎肝细胞和幼红细胞的研究报道,我们认为TfR2在红系造血方面具有十分重要的作用,而TfR2本身可能是反映骨髓红系造血潜能的指标,在诊断增生性贫血方面具有潜在临床应用价值。
【图文】:

琼脂糖,分析仪,纯度,成像


一、RNA鉴定 RNAOD26了ODZs。介于 1.8一2.0。将RNA在l%琼脂糖上电泳15min后紫外透射分析仪观察成像均见285、185、5S三条带(图1一1),表明总RNA无明显降解,提取的纯度较高。

扩增曲线,标准模板,拷贝数,荧光定量PCR


{…:书万29洲33书刀拍图1一 3GAPDH标准模板荧光定量P以扩增曲线、F主91一3魏众脚嵘PCR叭and二 ddynamie二 veof脚n珍ct1日卜““.}拢耘一与轰峥c峨认肠孕碑称刁3已加1胜奄,护七时咤’忍贬O甲 011.麟,O娜翔娜了鉴口沙沁2.花2月2滚4当O一厂二{肠,绮O准肠.加右当习止子弓睡拷贝数对数值图1一4G赶钱1标准品的栩崔曲线Figl一realti劝eesR卫欧田t匕rdcur说ofG泊I互)H利用相对定量解析方法建立GAPDH荧光定量PCR标准曲线。在模板量5个10倍梯度稀释范围内,Ct值与起始拷贝数间呈线性关系,20
【学位授予单位】:四川大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:R725.5

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本文编号:2594760

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