探究TLR4对小鼠肠黏膜紧密连接蛋白的调控作用

发布时间：2020-04-02 10:16

【摘要】：目的:探究Toll样受体4阻断剂(TLR4-Ab)对脂多糖(LPS)引起的小鼠肠黏膜紧密连接蛋白的损伤是否有拮抗作用。方法:将24只BALB/C小鼠分为对照组、模型组(LPS组)、TLR4处理组(TLR4-Ab组)(n=8),用10%水合氯醛麻醉小鼠(0.3m L/只),模型组予以腹腔注射LPS(5mg/kg)建立内毒素血症小鼠模型,TLR4处理组在腹腔注射LPS同时给予抗TLR4单克隆抗体(10μg/只)腹腔注射,对照组以生理盐水(1m L/kg)替代。各组分别于注射后3h处死小鼠,取各组小鼠远端小肠组织,采用RT-PCR及免疫组化法检测核转录因子-κBp65,肿瘤坏死因子-α及紧密连接蛋白Claudin1,Occludin,ZO-1的mRNA表达和蛋白定位表达。结果:1.在NF-κBp65的mRNA及蛋白表达水平上,LPS组明显高于对照组(P0.05),TLR4处理组明显低于LPS组(P0.05);2.在TNF-α的mRNA及蛋白表达水平上,LPS组明显高于对照组(P0.05),TLR4处理组明显低于LPS组(P0.05);3.在Claudin1,Occludin,ZO-1的mRNA及蛋白表达水平上,LPS组明显低于对照组(P0.05);TLR4处理组Claudin1,ZO-1的mRNA表达及Claudin1,Occludin,ZO-1的蛋白表达明显高于LPS组(P0.05)。结论:1.抗TLR4单克隆抗体可下调核转录因子NF-κBp65的mRNA和蛋白的表达;2.抗TLR4单克隆抗体可下调炎症因子TNF-α的mRNA和蛋白的表达;3.抗TLR4单克隆抗体可上调Claudin1、ZO-1的mRNA和Claudin1、Occludin及ZO-1蛋白的表达;4.抗TLR4单克隆抗体对LPS引起的紧密连接蛋白的损伤具有拮抗作用。
【图文】：

图 2 各组紧密连接蛋白及 TNF-α、NF-κBp65 阳性信号 IOD 值的比较*示 LPS 组与对照组相比，P＜0.05；#示 TLR4-Ab 组与 LPS 组相比，，P＜0.05C D EAB
【学位授予单位】：中国医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R720.597

【参考文献】

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本文编号：2611817