新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的亚低温治疗
发布时间:2020-04-09 20:42
【摘要】: 新生儿缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)是严重危害新生儿健康的疾病,可导致新生儿死亡及存活者遗留严重的神经系统后遗症,目前尚缺乏特效治疗措施。亚低温(28℃-35℃轻中度低温)具有抑制细胞代谢和酶的活性,延缓细胞死亡的作用。近年逐渐被儿科医生所重视。本研究用新生大鼠HIBD模型,以脑组织含水量、HE染色、微管关连蛋白-2(micro-tubule associated protein-2,MAP-2)免疫组化染色作为短期观测指标,以大鼠的学习、记忆功能作为长期观测指标,系统研究亚低温对HIBD的短期和长期保护作用,探讨亚低温治疗的最佳时机,深度,持续时间。 对象:Wistar7日龄新生大鼠,随机分到各项实验的各组:(1)探讨不同温度对HIBD的短期影响,包括29℃干预组、31℃干预组、34℃干预组、常温(37℃)恢复组、正常对照组(假结扎组)。(2)探讨不同低温持续时间对HIBD的短期影响,包括24小时、48小时、72小时低温干预组及常温(37℃)恢复组、正常对照组 郑州大学2002年研究生毕业论文 新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的亚低温治疗 (假结扎组人 D)探讨不同低温起始时间对iBD的短期影响, 包括HI后0分钟、30分钟、60分钟、90分钟、120分钟、6小时 低温干预组及常温u7 C广恢复组、正常对照组(假结扎组人 以 上各低温干预组每组22只动物。正常对照组每组20只动物。低 温干预组各取2只做探针动物,用以监测脑温。门)探讨低温干 预对HIBD的长期影响,包括*后立即29℃低温干预72 ’J\时组、 常温门7℃)恢复组、正常对照组(假结扎组人每组10只动物, 方法:*)新生大鼠MBD模型制作:新生大鼠乙醚吸入麻醉, 切开颈部皮肤,分离左侧颈总动脉并结扎,l小时后给予吸入8% 氧气加 92%氮气混合气体 55分钟。正常对照组(假结扎组)仅 切开颈部皮肤,分离左侧颈总动脉,不结扎亦不缺氧。u)亚低 温方法:将动物放入半导体可调恒温水浴箱内,维持至干预结束。 3)脑组织含水量测定:各组动物均于缺氧缺血后78小时处死, 快速取脑,除去嗅脑、小脑和脑干,分离左右侧大脑半球,用电 子天平精确称量,然后烘干再称重,用公式【(湿重-干重)/湿 重〕XI 00%计算脑组织含水量。N)病理学检测:各组动物于缺 氧缺血后78小时处死,快速取脑,5%甲醛溶液中固定后,,于前 联合及正中隆起平面作冠状切开,取中间部分常规脱水,石蜡包 埋。切片取AI.6mm平面,连续冠状切片6张,分作HE染色 2 郑州大学2002年研究生毕业论文 新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的亚低温治疗 和 MAP上免疫组织化学染色。染色结果经图象分析系统处理, 计算出脑梗塞的面积,然后根据公式:(损伤侧MAPZ染色阴性 区域面积/对侧面积)XI 00%计算脑损伤程度u)学习、记忆能 力指标测定:各组动物于生后42天用Y型三等份辐式迷宫器检 测其学习能力,第H天用同样方法检测其记忆能力。“)统计学 分析:应用 SPSS 10.0统计分析软件,结扎侧与结扎对侧比较 采用配对t检验,多组均数比较用单因素方差分析…ne-way ANOVA>组间两两比较用q检验,对数据进行统计学分析。数 据均以巨士SD表示,以P刃.05为差异有显著性。 结果:门)HE染色:常温恢复组镜下可见到各种病理学改变, 包括神经细胞的变性坏死等。而低温干预各组上述改变较轻。*) 常温恢复组结扎侧脑组织含水量明显增加,与结扎对侧及正常对照 组相比差异有显著性0狈.05人而低温干预各组脑组织含水量明 显减少,与常温恢复组相比差异有显著性p刃.05人()常温恢 复组结扎侧可见脑梗塞存在,而低温干预各组脑梗塞面积明显减少 oo.05人K)不同温度低温干预对 HIBD大鼠的影响:29 oC低 温干预组与3lOC、34oC低温干预组相比,脑组织含水量减少,差 异有显著性o狈.05人 31、34oC低温干预组相比,脑组织含水 量差异无显著性。不同温度低温干预各组脑梗塞面积相比,差异 3 郑州大学2002年研究生毕业论文 新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的亚低温治疗 均有显著性o川.05),且随着温度的降低,梗塞面积逐渐减少。 u)不同持续时间低温干预对WBD大鼠的影响:72小时低温 干预组与24小时与4S小时低温干预组相比,脑组织含水量减少, 差异有显著性o的.05);24小时、48小时低温干预组相比,脑 组织含水量差异无显著性。低温干预各组脑梗塞面积相比差异均 有显著性oO.05人 且随着低温于预持续时间的延长,梗塞面积 逐渐减少。u)不同起始时间低温干预对HIBD大鼠的影响:0分 韦、30分钟起始干预组与其余各低温干预组(60分钟、90分钟、 120分钟、6小时起始低温干预组)相比,脑组织含水量减少,差 异有显著性0刃.05人 但这两组间差异无显著性,其余各
【图文】:
图1不同温度干预对HIBD大鼠的影响:(1)29℃低温干预组、(2)31℃低温干预组、(3)34℃低温干预组(4)常温恢复组(5)正常对照组不同持续时间低温干预对HIBD大鼠的影响;(6)24小时低温干预组、(7)48小时低温干预组、(8)72小时低温干预组(9)常温恢复组(10)正常对照组不同起始时间低温干预对HIBD大鼠的影响:(11)H工BD后立即低温干预组、(12)HIBD后30分钟低温干预组、(13)HIBD后60分钟低温干预组(14)HIBD后90分钟低温干预组(15)HIBD后120分钟低温干预组(16)HIBD后6小时低温干预组、(17)常温恢复组(18)正常对照组MAP一2免疫组化染色,扫描仪直接扫描切片所得图像
正常对照组,冠状切片AI.6mm平面,皮质,MAP一2免疫组化染色4OOX
【学位授予单位】:郑州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2002
【分类号】:R722.121
本文编号:2621239
【图文】:
图1不同温度干预对HIBD大鼠的影响:(1)29℃低温干预组、(2)31℃低温干预组、(3)34℃低温干预组(4)常温恢复组(5)正常对照组不同持续时间低温干预对HIBD大鼠的影响;(6)24小时低温干预组、(7)48小时低温干预组、(8)72小时低温干预组(9)常温恢复组(10)正常对照组不同起始时间低温干预对HIBD大鼠的影响:(11)H工BD后立即低温干预组、(12)HIBD后30分钟低温干预组、(13)HIBD后60分钟低温干预组(14)HIBD后90分钟低温干预组(15)HIBD后120分钟低温干预组(16)HIBD后6小时低温干预组、(17)常温恢复组(18)正常对照组MAP一2免疫组化染色,扫描仪直接扫描切片所得图像
正常对照组,冠状切片AI.6mm平面,皮质,MAP一2免疫组化染色4OOX
【学位授予单位】:郑州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2002
【分类号】:R722.121
【参考文献】
相关期刊论文 前1条
1 吴婉芳;徐放生;张莉莉;蔡玲玲;林久治;;建立新生儿缺氧缺血性脑病动物模型[J];新生儿科杂志;1992年06期
本文编号:2621239
本文链接:https://www.wllwen.com/yixuelunwen/eklw/2621239.html
最近更新
教材专著